菥蓂中化学成分的分离、抗氧化活性及花红片中异牡荆苷含量的测定

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目的:  对菥蓂药材水提取物中的黄酮类化学成分进行分离鉴定,对得到的黄酮类化合物进行抗氧化活性研究,并测定分离得到的异牡荆苷在红花片中的含量。  方法:  通过对菥蓂药材干燥全草进行水提醇沉,依次用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇等不同有机相萃取,D101大孔树脂分离,硅胶柱层析分离,并结合高效半制备液相色谱法,对菥蓂有效活性部位进行黄酮类化合物的分离,用氢谱(1H-NMR )、碳谱(13C-NMR)、质谱(MS)确定得到的化合物的结构;用维生素C(Vc)为阳性对照,通过考查分离鉴定的5个黄酮类化合物的还原 Fe3+的能力和清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)能力、以及抑制油脂氧化的能力,来分析从菥蓂水提物分离的黄酮类化合物的抗氧化活性;运用高效液相色谱法(HPLC),对 10 份不同批次的花红片中异牡荆苷含量进行测定。  结果:  分离得到异牡荆苷,木犀草素,芹菜素,荭草苷,异荭草苷, 3-羟基吡啶,5-羟基-2-吡啶甲酸甲酯,其中异荭草苷,3-羟基吡啶,5-羟基-2-吡啶甲酸甲酯为菥蓂药材中首次分离得到的已知化合物。对分离得到的 5 种黄酮类化合物进行抗氧化活性研究,研究表明分离得到的乙酸乙酯部位中的 5 种黄酮类化合物均具有不同效果的抗氧化能力,并且抗氧化活性差异明显。运用高效液相色谱法(HPLC)测定花红片中异牡荆苷含量:紫外检测波长为270 nm,采取等度洗脱,异牡荆苷的保留时间约为11分钟。  结论:  水提醇沉方法可以有效的富集菥蓂药材中的黄酮类化合物。利用硅胶柱层次法和大孔树脂柱层析法,并结合高效液相色谱法分离制备异牡荆苷,荭草苷,异荭草苷,芹菜素,木犀草素,3-羟基吡啶,5-羟基-2-吡啶甲酸甲酯等化合物方法简单易行,快速高效。对 5 种从菥蓂药材中分离得到的黄酮类化合物进行抗氧化活性测定,分析表明一些黄酮类化合物,如荭草苷,异荭草苷和木犀草素具有良好的抗氧化活性,但都比维生素 C 弱。推测荭草苷,异荭草苷和木犀草素可能为菥蓂药材乙酸乙酯部位抗氧化活性强弱起到主要作用。通过测定10份不同批次的花红片中异牡荆苷的含量,分析确定异牡荆苷在不同批次花红片中的平均含量,本研究所建立的高效液相色谱法(HPLC)测定异牡荆苷含量,稳定性好,灵敏度高,能够对花红片中的异牡荆苷含量进行快速准确的测定。
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