【摘 要】
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该研究从三方面进行了肝癌相关糖疫苗的研究:1)利用针对神经节苷脂GD3的单抗对人肝癌标本进行免疫组织化学染色,以确证他人应用高效薄层层析鉴定出GD3作为肝癌相关糖抗原的报
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该研究从三方面进行了肝癌相关糖疫苗的研究:1)利用针对神经节苷脂GD3的单抗对人肝癌标本进行免疫组织化学染色,以确证他人应用高效薄层层析鉴定出GD3作为肝癌相关糖抗原的报道;2)化学合成文献报道的肝癌相关糖抗原ⅣGalNAcβ-GDla将之与蛋白载体KLH偶联,以QS-21为佐剂,或应用热休克蛋白70(HSP70)生物佐剂,检测其免疫原性及抗肿瘤效果;3)从正常肝组织提取纯化HSP,通过HSP70与肝癌细胞的糖肽进行体外重组,利用肝癌动物模型鉴定出能诱导机体特异性免疫应答的肝癌相关糖疫苗及其糖抗原.为了保证糖肽与HSP70结合,我们合成了能与HSP特异性结合的8肽.将之与糖肽化学偶联后,再与HSP70结合.为了制备出能诱导机体主动特异性免疫应答并能有效诱导细胞免疫应答的肝癌相关糖抗原,我们正在探索HSP70对糖肽的抗原提呈作用.之所以选择HSP70是因为,近年来Srivastava PK等对HSP在肿瘤免疫应答中所起的作用进行了大量研究,他们的研究证实:HSP是一组具有重要生理功能的蛋白质分子家庭,参与多种蛋白质和肽的折叠、解析叠、装配和转运以及折叠不正确蛋白质的降解等过程,对于维持细胞正常结构等功能起着重要作用.肿瘤细胞和病毒感染细胞来源的HSP在没有佐剂参与的情况下能诱导机体的细胞免疫应答,但其免疫原性并不是由HSP本身所引起的,而是由与之结合的肽(其中不乏糖肽)造成的.不仅肿瘤细胞来源的HSP能激发特异性免疫,体外合成及重组的HSP-肽复合物也有同样的作用.HSP-肽复合物作为外源性物质能被Mφ、DC等抗原提呈细胞(APC)所摄取,在APC内进入MHC-I的抗原提呈途径,将抗原肽提呈给CD8<+>T细胞,从而诱导肿瘤特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.这表明,HSP能作为抗原的特殊运输载体,引起免疫佐剂效应.
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