屎肠球菌活菌及其热灭活菌对哺乳期仔猪肠道菌群结构和免疫应答的影响

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本研究旨在对比屎肠球菌活菌和热灭活菌对哺乳期仔猪肠道菌群结构和免疫应答的作用效果以及对猪小肠上皮细胞免疫应答的影响,为阐明屎肠球菌活菌和热灭活菌调节仔猪肠道健康的作用机理提供基础。主要研究结果如下:试验一:试验选用健康的杜×长×大新生仔猪9窝,随机分为对照组、活菌组和灭活菌组三个处理。从出生开始至6日龄,各组仔猪每天分别经口灌服无菌10%脱脂乳、含有益生屎肠球菌活菌的10%脱脂乳(1×1O8CFU/mL)和含有益生屎肠球菌热灭活菌的10%脱脂乳(1×1O8 CFU/mL)各10 mL/(头.d)。分别于7日龄和21日龄时采集仔猪空肠和回肠黏膜以及回肠和结肠内容物样本,分析肠道内容物的菌群结构和黏膜细胞因子的表达和分泌量。结果表明,益生屎肠球菌活菌和热灭活菌均显著降低仔猪(21日龄)回肠菌群中Lactobacillus属的相对丰度(P=0.03),并且都显著降低仔猪(7日龄)结肠菌群中Bacteroides属的相对丰度(P=0.03),均显著增加仔猪(21日龄)结肠菌群中Proteobacteria门(P=0.05)的相对丰度。益生屎肠球菌活菌和热灭活菌对仔猪肠道菌群其它门和属的作用趋势也基本一致,但是均不显著。试验二:IPEC-1细胞试验设对照组,活菌组和灭活菌组三个处理,分别加入PBS、益生屎肠球菌活菌(1×10~8CFU/mL)和热灭活菌(1×10~8CFU/mL),与细胞共孵育1h和3 h,收集细胞。结果表明,益生屎肠球菌活菌显著增加仔猪(21日龄)空肠黏膜细胞因子IL-8分泌量(P<0.05),益生屎肠球菌热灭活菌显著增加仔猪(21日龄)空肠黏膜细胞因子IL-8基因表达水平(P<0.05),并且益生屎肠球菌活菌和热灭活菌均显著增加仔猪(21日龄)回肠黏膜细胞因子TNF-α基因表达水平(P<0.05)。益生屎肠球菌活菌和热灭活菌均显著增加1h和3h下的IPEC-1细胞的细胞因子IL-8、TNF-α和TGF-β基因表达水平(P<0.05),但是,活菌和热灭活菌对LL-8(3h)和TNF-α(1h)基因表达水平的影响有显著差异(P<0.05)。此外,益生屎肠球菌活菌和热灭活菌均显著降低IL-10(3h)基因表达水平(P<0.05)。综上所述,益生屎肠球菌活菌和热灭活菌对仔猪小肠黏膜和猪肠上皮细胞的细胞因子应答的调节作用相似。综上,益生屎肠球菌活菌和热灭活菌对哺乳期仔猪回肠和结肠菌群以及小肠黏膜细胞因子免疫应答的影响大体一致。
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