【摘 要】
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泥鳅是优质水产养殖品种,市场需求量大。近年来规模化养殖导致泥鳅病害多发、养殖环境恶化,制约了产业的健康长远发展,因此,寻找适宜的益生菌株作为饲料添加剂以改善鱼体健康、提高对疾病的抵抗能力是目前的优先策略。本研究旨在探究饲料中添加贝莱斯芽孢杆菌MSP05（Bacillus velezensis MSP05）对泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）幼鱼生长、消化及非特异性免疫的影
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泥鳅是优质水产养殖品种,市场需求量大。近年来规模化养殖导致泥鳅病害多发、养殖环境恶化,制约了产业的健康长远发展,因此,寻找适宜的益生菌株作为饲料添加剂以改善鱼体健康、提高对疾病的抵抗能力是目前的优先策略。本研究旨在探究饲料中添加贝莱斯芽孢杆菌MSP05（Bacillus velezensis MSP05）对泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）幼鱼生长、消化及非特异性免疫的影响。选取360尾初始均重为（3.24±0.14）g的泥鳅幼鱼,共分为4组,每组3个重复。对照组、3个试验组分别饲喂添加0（CS）、1×10~6（BS1）、1×10~7（BS2）、1×10~8（BS3）CFU/g B.velezensis MSP05的日粮。试验进行8周后,分别对泥鳅幼鱼的生长性能、肠道消化酶活性、肠道形态、肠道菌群、血清抗氧化指标、非特异性免疫酶活性以及免疫相关基因表达等方面进行了研究,并开展了嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）的攻毒试验。结果显示,相较于CS组,B.velezensis MSP05显著提高了泥鳅幼鱼的增重率（WGR）和特定生长率（SGR,P＜0.05）,且试验组间无显著差异（P＞0.05）。随着B.velezensis MSP05添加量的增加,肠道蛋白酶、淀粉酶活性先升高后降低,在BS2组达到最大值,脂肪酶活性则不断升高;三种消化酶活性最大分别显著提升76.85%、324.47%和700.14%。BS1组泥鳅前肠、中肠形态改善效果最显著（P＜0.05）,肠黏膜皱襞完整且绒毛变高,肠壁、肌层厚度增加;而对于后肠,BS1组反而呈现损伤效果,BS2组泥鳅后肠形态相对最佳。相较于CS组,试验组血清过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LZM）、碱性磷酸酶（AKP）活性均显著提高,丙二醛（MDA）含量显著降低（P＜0.05）。B.velezensis MSP05还显著降低了嗜水气单胞菌攻毒后泥鳅幼鱼的死亡率（P＜0.05）。综合分析,添加1×10~7CFU/g B.velezensis MSP05的BS2组泥鳅幼鱼生长、消化和非特异性免疫的综合提升效果最佳,且肠道形态未造成损伤。选取益生效果最优的BS2组（简称BS组）与对照组（CS组）对比进行肠道菌群和基因表达分析。与CS组相比,BS组的泥鳅肠道菌群物种优势物种分布更加集中,仅排名前两位的罗尼亚气单胞菌（Aeromonas veronii）、琥珀酸黄杆菌（Flavobacterium succinicans）占比高达58.00%;门水平上,试验组中变形菌门（Proteobacteria）丰度显著下降（P＜0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）丰度显著增加（P＜0.05）;属水平上,黄杆菌属（Flavobacterium）相对丰度明显提高,而气单胞菌属（Aeromonas）、食酸菌属（Acidovorax）、假单胞菌属（Pseudomonas）、希瓦氏菌属（Shewanella）和Paludibacter丰度降低（P＜0.05）。DEGseq基因表达差异分析结果表明:共获得1034个显著上调基因,548个下调基因,BS组的生长基因（IGF-I）和免疫基因（C9和GSH-Px1a）表达水平显著上调（P＜0.05）,其他多数免疫相关基因则不同程度下调;GO功能富集分析也发现BS组富集于免疫应答、免疫系统过程等生物学过程功能类型中的基因显著下调。综上,饲料中添加B.velezensis MSP05能够显著促进泥鳅幼鱼生长,提高消化酶、抗氧化酶活性,改善肠道形态,提升非特异性免疫及对嗜水气单胞菌的抗病力;B.velezensis MSP05能够作为泥鳅饲料添加剂使用。该论文有图12幅,表27个,参考文献151篇。
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