富血小板血浆及自体牙周韧带细胞移植修复牙周组织缺损的实验研究

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目的研究富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对牙周韧带细胞(periodontal ligament cells, PDLCs)在牙骨质表面附着和增殖的作用,探讨其是否能促进牙周组织再生;并将不同数量牙周韧带细胞植入慢性实验性牙周缺损内,观察细胞植入数量与牙周组织再生量的关系。方法1.采用组织块法培养人牙周韧带细胞,取第四代细胞用于实验。分别制备健康牙和牙周病患牙牙骨质块置于96孔板,附着实验在接种细胞后加入含10%PRP和不含PRP的培养液,4小时后MTT法检测附着细胞数量;增殖实验在接种细胞后常规培养24h,加入不含血清的培养液继续培养48h ,此后更换为含10%PRP和不含PRP的培养液,24h后MTT法检测细胞数量;并以扫描电镜观察细胞在牙骨质表面的情况。2.人工构建4只Beagle犬慢性实验性牙周缺损模型,体外培养犬的自体牙周韧带细胞,分别调整细胞浓度至5×105/ml、5×106/ml和5×107/ml,各取20μl接种于胶原膜上,将载有1×104、1×105和1×106PDLCs的胶原膜植入牙周缺损内,常规覆盖BIO-GIDE膜。12周后制作病理切片,进行组织学观察,测量新生牙骨质长度百分率和新生牙槽骨面积百分率,结果进行统计学分析。结果1.附着实验中10%PRP组附着细胞数量较不含PRP组明显增多;增殖实验中10%PRP组和不含PRP组细胞数量无明显差异。2.各实验组和对照组均可见不同程度牙周组织再生,1×104PDLCs组和1×105PDLCs组与对照组的新生牙骨质长度百分率和新生牙槽骨面积百分率无显著性差异,1×106PDLCs组的新生牙槽骨面积百分率较对照组显著增高。结论1. 10%PRP可促进人PDLCs在健康牙和牙周病患牙牙骨质块上的附着,但对细胞在牙骨质块上的增殖无明显影响。2.在实验性牙周缺损内植入PDLCs,可促进牙周组织再生,其有效浓度约为5×107/ml,有效数量约为1×106PDLCs。
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