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1．本实验探讨了适合水牛胎儿成纤维细胞（BFF）体外培养的体系。组织块法培养的水牛胎儿原代成纤维细胞生长状态良好，增殖旺盛；细胞经4℃预冷的胰蛋白酶室温下消化，可传代培养至32代；细胞冷冻保存解冻后复苏率达70％～80％；染色体分析结果显示，二倍体细胞所占比例始终保持在80％～90％之间，各代细胞（5th、10th、15th）之间差异不显著（p＞0.05）；巢式PCR法支原体污染检测结果发现，第9、18、28代细胞呈阴性，第32代细胞呈阳性。结果表明，该培养体系比较适合水牛胎儿成纤维细胞的培养；培养至15代的BFF细胞核型相对比较稳定；培养至28代的BFF未受支原体感染。 2．探讨胰岛素和条件培养液对低密度水牛胎儿成纤维细胞增殖的影响。结果显示，添加胰岛素（2IU／mL）的培养液组细胞的平均增殖指数显著高于条件液组和对照组（3.49±0.07 vs 1.47±0.29，2.97±0.17；p＜0.05），而条件培养液组细胞的平均增殖指数不及对照组，呈显著差异（1.47±0.29 vs 2.97±0.17；p＜0.05）。同时，细胞增殖指数随细胞密度的逐渐增大而呈上升趋势，其中8个／滴（50 μl）细胞的平均增殖指数显著高于1个／滴和2个／滴细胞（3.11±0.46 vs 2.09±0.83，2.48±0.61；p＜0.05）。由此表明，适宜浓度的胰岛素对水牛胎儿成纤维细胞的增殖具有促进作用；单个细胞在体外能培养增殖，但其增殖速度低于群体培养。 3．探讨不同的处理方法和处理时间对水牛胎儿成纤维细胞周期的影响。流式细胞仪周期时相分析结果显示，血清直接饥饿处理或梯度饥饿处理后其G0／G1期成纤维细胞的比例均显著高于一般培养组（88.40±0.75％，87.00±0.78％ vs 84.09±1.16％；p＜0.05），但血清直接饥饿组和梯度饥饿组之间无显著差异（p＞0.05）。用血清直接饥饿法处理水牛胎儿成纤维细胞3d时的G0／G1期细胞比例显著高于0d、1d、2d、6d的细胞比例（p＜0.05），但3d、4d、5d的G0／G1期细胞比例之间差异不显著（p＞0.05）。结果表明，血清直接饥饿和梯度饥饿法均能有效地使水牛胎儿成纤维细胞同步于G0／G1期；血清直接饥饿处理细胞3d可取得较好的细胞周期同步化效果。