目的:探究去铁胺对糖尿病大鼠心肌细胞的影响,评价去铁胺对糖尿病大鼠七氟烷后处理心肌保护作用的影响,为糖尿病患者的心肌保护寻找新的方法。方法:(1)去铁胺对糖尿病大鼠心肌细胞铁蛋白自噬的影响。240～290g雄性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为3组(n=8):正常组(N组),糖尿病组(D组)以及去铁胺处理组(C组)。糖尿病组(D组)的大鼠在禁食12h后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55mg.,kg,喂养普通饲料4周。去铁胺处理组(C组)在糖尿病建模成功后,在第4周每日腹腔注射去铁胺0.2 mg/g。在腹腔注射链脲佐菌素后第3天、10天、17天、24天、31天,监测大鼠24h饮水量,日间随机血糖和体重。31d时处死大鼠,取血标本测肌钙蛋白I(cTnI)浓度,开胸取心脏,包埋固定后行HE染色和普鲁士蓝染色观察病理学改变。采用Western-blot法测定心肌微管相关蛋白311(LC3Ⅲ)、铁蛋白重链(FTH)和核受体共同激活因子4(NCOA4)的表达。(2)去铁胺联合七氟烷后处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时核受体共同激活因子4(NCOA4)介导的铁蛋白自噬的影响。240～290g雄性糖尿病大鼠,采用随机数字表法分为5组(n=8),假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血再灌注+氟烷后处理组(IR+SEVO组)、缺血再灌注+去铁胺处理组(IR+DFO组)、缺血再灌注+去铁胺+七氟烷后处理组(IR+DFO+SEVO组)。Sham组持续灌注150 min;IR组采用左侧开胸结扎心脏冠脉前降支30min,再灌注120min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型;IR+SEVO组在再灌注前期15min吸入2.5%七氟烷;IR+DFO组于术前一周腹腔注射去铁胺(DFO)0.2 mg·g-1·d-1,余处理同IR组;IR+DFO+SEVO组在去铁胺处理1周后进行缺血-再灌注处理,再灌注前期15分钟吸入2.5%七氟烷。观察大鼠心肌缺血再灌注模型制备过程中心率、平均动脉压的变化,再灌注2小时后取静脉血测血清肌钙蛋白I的浓度,采用TTC法测心肌梗死范围、采用HE染色法观察心肌组织形态学变化、Westernblot法测定心肌微管相关蛋白3 Ⅱ(LC3Ⅱ)、铁蛋白重链(FTH)和核受体共同激活因子4(NCOA4)的表达。结果:(1)糖尿病组和去铁胺组在腹腔注射链脲佐菌素3天后血糖水平升达16.6 m mol/l,与N组比较,D组,C组在注射STZ第3天、10天、17天、24天、31天日间随机血糖和饮水量明显升高(P<0.05),D组和C组体重在17天、24天、31天明显降低(P<0.05)。病理切片示:N组心肌结构清晰整齐,染色均匀,细胞形态正常,普鲁士染色示心肌细胞中有少量含铁小粒;D组心肌纤维排列基本整齐,细胞轻度水肿,普鲁士染色示心肌细胞中含铁小粒增多;C组心肌纤维排列基本整齐,细胞形态基本正常,普鲁士染色示心肌细胞中含铁小粒与正常组相近。与N组比较,D组 cTnI、FTH、NCOA4、LC3Ⅱ含量升高(P<0.05);与 D 组比较,C 组 cTnI、FT H、NCOA4、LC3Ⅱ 含量下降(P<0.05)。(2)与Sham组比较,其他四组血清肌钙蛋白I浓度、心肌梗死体积都明显增高(P<0.05);IR组、IR+SEVO组的LC3Ⅱ和NCOA4表达上调;与IR组比较,IR+DFO+SEVO组在再灌注前60min心率明显减慢,血压升高,血清肌钙蛋白I浓度、心肌梗死体积、FTH、LC3Ⅱ和NCOA4表达下降(P<0.05)。与IR+SEVO组比较,IR+DFO+SEVO组再灌注60min、120min平均动脉压升高,cTnI、FTH和NCOA4表达下降(P<0.05)。心肌病理学改变:Sham组大鼠心肌细胞形态整齐;组心肌纤维排列紊乱,细胞间连接松散,细胞形态不规则,胞浆肿胀和胞核破坏出现核碎裂;IR+SEVO组,IR+DFO组细胞损伤较IR组减轻,出现轻度的胞浆肿胀和少量的细胞核破坏,IR+DFO+SEVO组心肌细胞结构较完整,胞质染色较均匀,但细胞间连接不紧密,出现少量空泡。结论:(1)去铁胺处理1周对糖尿病大鼠血糖水平、尿量无明显影响,但可降低心肌cTnI浓度及心肌细胞铁蛋白自噬水平,改善糖尿病心肌损伤。(2)七氟烷后处理对糖尿病大鼠心肌细胞铁蛋白自噬通路无明显影响。(3)去铁胺联合七氟烷后处理通过抑制NCOA4介导的铁蛋白自噬,减轻糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤。