羌活叶多糖的提取及抗氧化活性研究

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羌活(Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang)是伞形科(Umbelliferae)羌活属(Notopterygium)多年生草本植物,其根及根茎作中药羌活用,具有重要的药用价值,中医临床多用于治疗感冒风寒、头痛无汗、风湿湿痹、骨节酸疼等。现代药理学研究,羌活具解热、镇痛、抗炎、抗过敏、抗病毒等作用。在羌活生产过程中,羌活叶被当作废弃物丢掉,未对其进一步开发利用,且关于羌活叶多糖的报道鲜少。本研究以羌活叶为材料,通过热水提取、超声提取、纤维素酶提取三种提取方法得到羌活叶多糖,并选择提取率高的提取方式进行优化。纤维素酶提取的羌活叶多糖经过纯化后分析其理化性质和体外抗氧化活性,以期为羌活叶的开发利用提供理论基础。主要研究结果如下:1.热水提取、超声提取、纤维素酶提取的羌活叶多糖提取率分别为6.36%、6.16%、7.83%,因此,选取纤维素酶提取的方法提取羌活叶多糖并优化其提取工艺;通过响应面法优化其提取工艺,酶解时间为62 min,酶解温度为71℃,液料比为32:1(m L/g),酶加量为3.2%,其多糖提取率为8.407%。2.羌活叶粗多糖的DPPH自由基清除能力随浓度的升高而增强,在3 mg/m L时,水提粗多糖、超声粗多糖、酶提粗多糖的清除率分别为76.11%、55.96%、75.89%,IC50分别为0.271 mg/m L、1.298 mg/m L、0.689 mg/m L。羌活叶粗多糖对·OH自由基的清除能力随浓度的升高而增强,当浓度达到3 mg/m L时,其清除能力最强,水提粗多糖、超声粗多糖、酶提粗多糖的清除率分别是92.55%、88.69%、90.55%,IC50值分别为0.154mg/m L、0.241 mg/m L、0.253 mg/m L。羌活叶粗多糖对ABTS·+自由基清除的影响,也是随多糖浓度的升高而升高,当浓度达到3 mg/m L时,水提粗多糖、超声粗多糖、酶提粗多糖的清除率分别是95.15%、85.21%、92.21%,IC50值分别为0.274 mg/m L、0.334mg/m L、0.233 mg/m L。三种提取法所提取的羌活叶粗多糖均具有一定的总还原能力,且随多糖浓度的升高而升高。表明三种提取方法提取的羌活叶粗多糖具有较强的抗氧化活性。3.通过Sevag法多次除蛋白及透析纯化羌活叶多糖,得到的总多糖含量为60.78±3.14%,糖醛酸含量为18.69±1.22%,仅含少量的蛋白质和多酚。4.通过测定纯化后的羌活叶多糖(NILP)对自由基清除能力评价其抗氧化活性。当浓度达到3 mg/m L时,NILP对DPPH的清除率最大,达70.74%,IC50为0.941 mg/m L。当浓度达到3 mg/m L时,NILP对·OH自由基的清除率最大,达93.18%,IC50为0.204mg/m L。NILP对ABTS自由基清除能力随浓度升高而增强,当浓度达到3 mg/m L时,NILP对ABTS对自由基的清除率最大,达89.44%,IC50为0.258 mg/m L。此外,NILP同样具有一定的总还原力。
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