【摘 要】
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转移是恶性肿瘤区别于良性肿瘤的主要生物学标志之一,也是导致晚期恶性肿瘤患者死亡的重要原因。恶性肿瘤绝大多数起源于上皮组织,即“癌”,而90%癌的转移是通过淋巴道途径实
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转移是恶性肿瘤区别于良性肿瘤的主要生物学标志之一,也是导致晚期恶性肿瘤患者死亡的重要原因。恶性肿瘤绝大多数起源于上皮组织,即“癌”,而90%癌的转移是通过淋巴道途径实现的,因此,对癌淋巴道转移机制的研究有助于肿瘤的早期诊断及有效治疗。蛋白质组学作为后基因组时代研究的一个重要内容,已经广泛深入到生命科学和医学的各个领域,它可以从细胞蛋白质整体水平研究肿瘤淋巴道转移机制。1975年由O’Farrell建立的双向凝胶电泳技术凭借其出色的分辨能力,迄今为止仍然是蛋白质组学研究中的核心技术。本实验采用载体两性电解质双向凝胶电泳(2-DE)技术,通过分离小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株细胞的总蛋白,并比较两者的蛋白质表达谱,展示两者差异,以发现与肝癌淋巴道转移相关的蛋白质分子,为进一步研究肝癌淋巴道转移机制奠定基础。方法分别采用超声破碎和化学裂解方法提取小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移株(Hca-F)和低转移株(Hca-P)的总蛋白,比色法测定蛋白质浓度,载体两性电解质双向凝胶电泳分离Hca-F和Hca-P的总蛋白,凝胶经考马斯亮蓝显色后,PDQuest8.0图像分析软件进行比对分析,识别差异表达的蛋白质。结果1.蛋白质浓度运用超声破碎法处理细胞测得Hca-F总蛋白浓度为8.54μg/μl,Hca-P为8.53μg/μl。运用化学裂解法处理细胞测得Hca-F总蛋白浓度为5.49μg/μl,
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