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目的:了解不同阶段帕金森病大鼠模型纹状体内谷氨酸(Glutamate,Glu)、g-氨基丁酸(gama-aminobutyric acid, GABA)和多巴胺(dopamine, DA)之间的相互关系,从而进一步探讨帕金森病的发病机制。
方法:采用脑微透析术结合高效液相色谱 (HPLC)动态监测建模第3-6周溶剂对照组、假手术组和帕金森模型组纹状体透析液中的谷氨酸、GABA和多巴胺的变化,6周后将各组大鼠用PBS灌注换血,4%多聚甲醛+0.3%戊二醛心脏灌注固定取脑,做5mm的黑质部石蜡切片,免疫组织荧光化学染色,观察黑质部多巴胺、谷氨酸及GABA的变化,并统计分析。
结果:(1) PD组多巴胺浓度随时间逐渐减少,到第5周仅为溶剂对照组和假手术组的1/5;(2)PD组谷氨酸浓度随时间逐渐升高,到第6周是溶剂对照组和假手术组的1倍左右。(3)PD组GABA浓度呈下降趋势,到第 6周降至溶剂对照组、假手术组的1/2。(4)建模后第6周免疫荧光组织化学结果显示,PD组毁损侧黑质GABA含量较健侧少。(5)建模后第6周,PD组毁损侧黑质的TH、GABA的表达数低于与溶剂对照组和假手术组的毁损侧的TH和GABA,而谷氨酸表达量增加;PD组健侧黑质的TH、GABA与溶剂对照组和假手术组的健侧黑质相比,同样有所减少,而谷氨酸的表达量增加。(6)黑质致密部TH-FITC和GABA-Rh、TH-Rh和Glu-FITC荧光免疫染色出现双阳性细胞。
结论:1.帕金森病大鼠模型脑内,谷氨酸与多巴胺可能存在相互促进的关系。
2.毁损侧GABA含量随帕金森病程延长而下降。
3.左右侧多巴胺、谷氨酸及GABA含量在帕金森病晚期均有相似变化,说明毁损侧和健侧可能通过某些通路相互影响。
4.荧光免疫染色结果提示神经元中可能存在神经递质共存现象。