【摘 要】
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目的：揭示IGF-1保护心肌细胞免于凋亡的更为精细的作用机制，为阐明IGF-1抗心肌细胞凋亡的机制提供线索。
方法：⑴体外培养乳鼠原代心肌细胞，加入IGF-1(10nM)的同时分别加入P
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目的：揭示IGF-1保护心肌细胞免于凋亡的更为精细的作用机制，为阐明IGF-1抗心肌细胞凋亡的机制提供线索。
方法：⑴体外培养乳鼠原代心肌细胞，加入IGF-1(10nM)的同时分别加入PI3、ERK1/2、Raf-1(20μM)三条通路抑制剂，通过Realtime-PCR和Western Blot方法检测BTEB及CYP3A基因表达情况以观察IGF-1通过哪条通路对BTEB及CYP3A基因产生影响。⑵转入BTEB特异性siRNA，通过Realtime-PCR和Western Blot方法检测CYP3A基因表达情况以观察BTEB对CYP3A基因的影响。⑶用无血清加过氧化氢(200μM)诱导乳鼠原代心肌细胞凋亡，然后转染CYP3A特异性siRNA，通过Hoechst33258、TUNEL、Caspase-3及AnnexinV-FITC/PI双染色等检测方法检测乳鼠心肌细胞凋亡情况。
结果：①IGF-1通过ERK1/2通路抑制BTEB及CYP3A基因表达。②BTEB抑制CYP3A基因的表达。③通过下调CYP3A基因表达可以改善无血清加过氧化氢诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡情况。
结论：IGF-1可通过“ERK1/2-BTEB-CYP3A”通路保护心肌细胞免于凋亡，这提示了IGF-1可能通过对线粒体功能的调控，保护心肌细胞免于凋亡。
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