蛋白质与蛋白质间之间的相互作用是细胞各项生命活动正常运作的基础,是细胞各项功能实现的重要途径。本研究利用酵母双杂交为技术,以14-3-3epsilon为诱饵蛋白,筛选出人胎脑cDNA文库中与之有相互作用的蛋白。捕捉到一个诱饵蛋白KICbeta。KICbeta是驱动蛋白家族的成员之一,在神经细胞中,KICbeta功能是在轴突中沿微管合成方向运输突触泡前体至突触间隙。在神经瘤等癌细胞中经常杂合缺失,有研究表明KICbeta是一个单倍剂量不足的抑癌基因,过表达时可以诱导肿瘤细胞程序性凋亡。我们对其进行了生物信息学分析,并从人胎脑cDNA中扩增出该基因便于研究。利用GST pull-down技术和免疫共沉淀技术,分别验证了 14-3-3epsilon与KICbeta在体外和体内相互作用的特异性,证实两者在细胞内的结合力是很强的。由于KICbeta蛋白较大,结构域较多,我们将其分段研究,找出了 KICbeta与14-3-3epsilon结合的具体结构域,该作用区段为KICbeta的600-1250氨基酸。两蛋白共转染Hela细胞,荧光显示两蛋白共定位于细胞质。