丹参药材的水溶性成分主要是丹酚酸B,但是丹酚酸B 口服后在体内会降解成丹参素和低聚丹酚酸而起药效。为了得到高活性、易吸收的丹参素和低聚丹酚酸(一分子丹参素和一分子咖啡酸聚合物),本文主要研究了从微生物Absidia sp.D38s菌中获得的能特异性水解丹酚酸B的丹酚酸酯酶纯酶,以及酶转化丹酚酸B制备丹参素和低聚丹酚酸。利用Sepabeads SP207大孔吸附树脂对丹酚酸B粗品(10%)进行提纯,提纯后丹酚酸B的得率达到72.32%。采用缓冲液抽提、硫铵沉淀、离子交换层析、凝胶电泳法分离纯化从微生物Absidia sp.D38s菌中获得的能水解丹酚酸B的丹酚酸酯酶,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定为电泳单点的纯酶,其分子量约为36 kDa。丹酚酸酯酶的最适反应温度为35℃,在50℃以下稳定;最适反应pH是5.0,pH稳定范围是3.0-6.0。Cu2+、Fe3++对丹酚酸B有沉淀作用;Mg2+、Ca2+、K+、Na+、2n2+随着浓度的增加对酶反应促进作用逐渐减弱,最后转为抑制作用。在酶促反应动力学研究中,得到米氏常数Km=8.62 mmol/L,最大反应速度Vm=27.03 mmol/(L·h)。丹酚酸酯酶不能水解pNPP,但对丹酚酸B的酯键表现出特异水解活力。丹酚酸酯酶在底物浓度16 mg/mL,35 ℃,pH 5.0条件下,反应14 h水解6.4 g丹酚酸B,所得酶解产物经Sepabeads SP207大孔吸附树脂柱分离纯化后,水洗可得到丹参素单体5.68 g,得率为35.26%;经乙醇洗脱可得低聚丹酚酸单体6.80 g,得率为42.21%。利用超高效液相色谱-质谱联用对分离纯化后的酶解产物进行分析,确定产物Ⅰ为丹参素,其分子量为198;产物Ⅱ为低聚丹酚酸,其分子量为358,分子式为C18H14O8,系统名称为8-羟基-3-羧基-2-(3’,4’-二羟基)苯基-1-苯并呋喃-5-丙烯酸。