目的：制备鼠源抗人 CD138单克隆抗体，对其进行亚型鉴定，利用 mouse IgG-Primer合成抗体基因，获得抗体基因序列；利用其基因序列构建一种能够同时靶向 CD138分子和 CD3分子的双特异性抗体并对其功能进行验证。　　方法：通过杂交瘤技术获得鼠源抗人 CD138抗体，分子克隆构建重组双特异性抗体，Protein A纯化，综合运用 Western blot（WB）、Flow cytometry（FC）、Immunofluorescence（IF）等实验方法进行相关的功能验证。　　结果：经 Western blot，Flow cytometry，Immunofluorescence等实验技术方法验证，鼠源的抗CD138单克隆抗体特异性强，可用于后续重组抗体的制备；构建的双特异性抗体（m-STL002，h-STL002）可以与表达 CD138分子的细胞（RPMI-8226）以及表达CD3分子的细胞（Jurkat）进行结合，且不与 CD138-的肿瘤细胞系（K562）结合，体外功能验证也表明，重组双特异性抗体可以激活 T细胞，并对CD138+的细胞系进行特异杀伤。　　结论：基于鼠源单克隆抗体重组构建表达的双特异性抗体 anti-CD138×CD3具有靶向杀伤骨髓瘤细胞的生物活性，为细胞免疫治疗骨髓瘤疾病提供了临床研究基础。