随着大型集约化养殖业的发展,规模化的养禽生产中常伴有沙门氏菌病的发生,被感染的雏禽若不加以治疗,重者死亡,耐过者终身带菌,产出带菌蛋,不仅造成严重的经济损失,对公共卫生的危害也不容忽视。由于耐药性的产生,药物治疗效果差,可供选择药物的空间缩小。有效的疫苗接种对传染病的预防起着举足轻重的作用。目前,我国并没有针对鸭沙门氏菌病的标准疫苗。本研究根据川渝地区鸭源沙门氏菌的血清型分布情况,通过动物攻毒试验进行对比,筛选出一株血清型分布广且毒力最强的菌株作为研究对象。采用传统方法制备蜂胶灭活疫苗,对试验鸭进行免疫接种,从细胞免疫和体液免疫两个方面来检测该疫苗的免疫水平,对免疫效果进行评价,以期为鸭源沙门氏菌病的防控提供参考依据。本文所开展的研究和取得的结果如下：1本试验选取了12株鸭源沙门氏菌,在相同菌液浓度下对试验鸭进行分组攻毒,筛选出死亡率最高、毒力较强的菌株：用30种沙门氏菌诊断血清进行血清型鉴定为鸭源彻斯特沙门氏菌(1,4,[5],12：e,h：e,n,x),细菌毒力试验测得该菌株的LD50为1×108.47 CFU。将该菌株作为疫苗菌株,研制出三个浓度(108 CFU/ml、109 CFU/ml.1O10 CFU/ml)的蜂胶灭活疫苗；5倍免疫剂量接种试验鸭无异常症状,表明该疫苗安全性好；经攻毒保护试验得出1O8 CFU/ml.109 CFU/ml、1O10 CFU/ml三个浓度组的保护率依次为50%、80%、100%,说明疫苗浓度为1×1010 CFU/ml时能起到很好的保护作用。2本试验以6.64 jig/ml蛋白质浓度的DSC2013菌体裂解物为包被抗原,成功建立了检测DSC2013抗体的间接ELISA方法,其最佳的血清稀释倍数为400倍,酶标羊抗鸭IgG的最适工作浓度为2.50 μg/ml;对鸭抗鸭瘟、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌、葡萄球菌及鸭病毒性肝炎病毒等阳性血清检测结果均为阴性；阻断试验结果为阴性；板内和板间重复性试验的变异系数分别为1.10%～2.64%、1.53%-2.67%。3本试验利用D8C2013灭活疫苗(浓度为CFU/ml)免疫接种试验鸭,比较对照组和免疫组在细胞免疫水平和体液免疫水平上的差异,综合评价D8C2013蜂胶灭活疫苗的免疫原性：(1)用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测鸭淋巴细胞的体外增殖活性。脾脏淋巴细胞体外培养,在ConA刺激下免疫组细胞增殖能力明显高于对照组(P<0.05),二免组增殖能力比一免组高(P<0.05)；外周血淋巴细胞分别在ConA和疫苗抗原的刺激下,二者均能刺激淋巴细胞提高其增殖活性,免疫组的增殖能力明显比对照组高(P<0.05)；结果表明,疫苗免疫可以提高鸭淋巴细胞的体外增殖活性。(2)间接ELISA试剂盒检测鸭免疫前、后3 d、7 d、10 d、15 d、20 d、25 d的外周血液中IL-4和IFN-γ的含量。免疫组的IL-4和IFN-γ含量在免疫3d后呈现出逐渐升高的过程,与对照组相比差异显著(P<0.05)；二免组在免疫后20 d出现波峰,明显高于一免组(P<0.01)。(3)利用染色计数法检测鸭免疫前、后7 d、15 d、25 d白细胞的吞噬活性。免疫后三个组的PP和PI值都呈上升趋势,但免疫组升高的幅度比对照组更明显(P<0.05)；免疫后15 d,三个组差异不明显(P>0.05)；直至25 d后,对照组和一免组开始下降,二免组保持较高水平。(4)间接ELISA方法用于检测疫苗免疫后的血清抗体水平。免疫前鸭血清中具有一定的抗体水平,免疫后3d三组均呈现出下降趋势,免疫组的下降幅度明显大于对照组(P<0.01)。对照组持续下降至15 d,之后趋于稳定接近阴性值。免疫后7d-15d内,免疫组呈上升过程；15d后,一免组开始下降,二免组持续上升于30d达到波峰,40 d稍有下降但仍处于较高水平(P<0.01)。