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玉米灰斑病（gray leaf spot,GLS）是一种全球性叶部真菌病害,严重威胁玉米的生产。选育和利用抗病品种是防治灰斑病最经济有效的措施,而鉴定灰斑病抗性位点是玉米抗病分子育种的基础。本研究以灰斑病抗病自交系WGR和感病自交系DZ01为亲本组配的回交后代为材料,旨在对玉米灰斑病抗性位点进行鉴定,利用标记辅助选择对优良自交系的灰斑病抗性进行改良。主要研究结果如下:1、玉米灰斑病主效抗性QTL-qRgls1.06的鉴定,以灰斑病抗病自交系WGR与感病自交系DZ01杂交,再与DZ01回交构建BC1F1群体,卡方测验发现WGR对灰斑病的抗性是由一对显性主效抗性位点控制（p=0.7117）。混池分离分析结合遗传连锁分析在玉米第一染色体bin1.06位置处鉴定到一个主效抗性位点,命名为qRgls1.06,可解释55.77%的表型变异。2、qRgls1.06精细定位,在BC1F1定位群体中共筛选到61株重组单株,经表型鉴定将qRgls1.06缩小至标记M3-M5之间约6.02 Mb的区间内;进一步地,在BC2F1定位群体中共筛选到M3-M5区间发生重组的单株95株,子代测验将qRgls1.06精细定位至标记M13-M4之间,候选区间大小约2.38 Mb。该区间在B73参考基因组（B73Ref Gen＿v4.0）中含有5个与抗病密切相关的细胞壁相关激酶家族基因。3、qRgls1.06在灰斑病高发地区具有重要的育种应用价值,在BC3F2群体中,选择qRgls1.06WGR/WGR和qRgls1.06DZ01/DZ01两种基因型单株,表型鉴定发现两种基因型个体的百粒重差异显著(p=4.46×10-5),开花期和其他农艺性状表型无显著差异,表明qRgls1.06WGR/WGR可防止受害植株的粒重下降,进而减少产量损失。以自交系WGR作为qRgls1.06的供体,通过标记辅助选择将抗病等位基因qRgls1.06WGR导入到7个玉米优良自交系中,发现qRgls1.06WGR的导入可以显著提高受体材料对灰斑病的抗性。试验结果不仅表明qRgls1.06在玉米灰斑病抗性改良中具有重要价值,也为玉米灰斑病种质改良提供了分子标记和中间材料。