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目的： 分析和比较乳腺癌患者乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移和无转移淋巴结、外周血样本中的T细胞TCRβ链 CDR3（Complementarity determining region3）受体库的组成和特征，初步探讨乳腺癌患者T细胞免疫应答的空间异质性。 方法： 12名乳腺癌临床志愿患者来源于遵义医学院附属医院甲乳外科，具有腋窝淋巴结转移，临床分期Ⅱ期，筛选标准符合NCCN（美国国立综合癌症网络）乳腺癌指南和AJCC（美国癌症联合委员会）乳腺癌诊断标准，乳腺癌志愿患者遵从患者知情同意原则。 2采集2例乳腺癌志愿患者乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移和无转移淋巴结及外周血（EDTA-K2抗凝）样本，分离外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC），并提取所有样本的总 DNA。样本序列号命名为患者1（patient1，P1）的乳腺肿瘤组织样本（P1-1），腋窝肿瘤转移淋巴结样本（P1-2），腋窝无肿瘤转移淋巴结样本（P1-3），外周血样本（P1-4），患者2（patient2，P2）的乳腺肿瘤组织样本（P2-1），腋窝肿瘤转移淋巴结样本（P2-2），腋窝无肿瘤转移淋巴结样本（P2-3），外周血样本（P2-4）。 3人T细胞TCRβ链CDR3建库和高通量测序（High-throughput sequencing，HTS）：Illumina Solexa HTS测序出各样本CDR3序列，CDR3受体库的制备、测序和质控均由美国华盛顿医学院Adaptive Biotechnologies ImmunoSEQ完成。 4 T细胞TCRβ链CDR3受体库组成和特征分析：测序后获得的原始数据上传至免疫遗传学数据库(Immunogenetics database，IMGT），根据 IMGT数据库HighV-QUEST软件和VBA编程等，初步分析各样本T细胞TCRβ链CDR3受体库的TRBV、TRBJ家族分布及 CDR3区特征等，序列的分析与储存在 EXCEL（2010版本）中完成并通过Graphpad prism5软件作图。 结果： 12名乳腺癌志愿患者八个样本总 DNA在琼脂糖凝胶电泳预测位置出现清晰的条带，经Adaptive Biotechnologies ImmunoSEQ检测，八个样本总DNA在浓度和总量上均达到建库测序要求。 2各样本 T细胞 TCRβ链 CDR3受体库 HTS测序所得原始序列经IMGT/HighV-QUEST分析后结果如下：P1乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结、外周血样本T细胞TCRβ链CDR3序列总数/独特序列数分别为：796056条/8131条，1040216条/5719条，1767820条/31132条，1715292条/14270条；P2乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结、外周血样本 T细胞 TCRβ链 CDR3序列总数/独特序列数分别为：1556849条/17320条，1673041条/80653条，1335602条/43757条，1472189条/31276条。 3 P1和P2乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结、外周血样本表现出不同的TCRβ链CDR3受体库克隆，在不同的组织部位存在特异性的TRBV高频取用。 4对各样本排名前10的克隆序列分析发现P1乳腺肿瘤组织和腋窝肿瘤转移淋巴结存在相同的优势配对TRBV10-3-TRBJ1-5，P2乳腺肿瘤组织和腋窝肿瘤转移淋巴结存在相同的优势配对TRBV27-TRBJ1-5，与腋窝无转移淋巴结和外周血不同。 5每例患者乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结、外周血样本T细胞TCRβ链CDR3受体库各个样本之间有着不同比例的CDR3重叠。其中，乳腺肿瘤组织与腋窝肿瘤转移淋巴结重叠相对较高，在乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结和外周血的重叠序列中，乳腺肿瘤组织高频表达的序列在外周血表达较低。 结论： 乳腺癌患者乳腺肿瘤组织、腋窝肿瘤转移淋巴结、腋窝无肿瘤转移淋巴结和外周血中，T细胞TCRβ链CDR3受体库分别有着独特的组成和特征，T细胞CDR3受体库的这种空间异质性提示乳腺癌患者局部和全身有着不同的T细胞免疫应答，可为乳腺癌的免疫机制、免疫防治研究提供基础数据和新的研究思路和技术。