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目的肺癌严重威胁人类的健康,其复发率和死亡率逐年上升,寻找肺癌特异性标志物,建立高效的检测方法尤为重要。鳞状细胞癌抗原SCCA(Squamous cell carcinoma antigen,SCCA)是丝氨酸蛋白抑制剂的一种,在鳞状上皮细胞中高表达,分为SCCA1及SCCA2两种亚型,基因高度同源,92%的蛋白氨基酸序列一致,但是功能不同。研究表明SCCA的表达与鳞状细胞癌的发生进展具有相关性,在最近研究中,SCCA1在肺癌患者中高表达,而在肺良性疾病或者健康人中基本不表达。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是游离于血液循环的肿瘤细胞,一旦在血液中检出循环肿瘤细胞预示着肿瘤的生成或转移。由于循环肿瘤细胞在血液中含量极少难以检测出来,而循环肿瘤细胞表达水平与mRNA表达水平具有一致性。因此,检测循环肿瘤细胞中的mRNA具有广阔的应用前景。本研究旨在建立SCCA1 mRNA定量检测方法,探讨在肺癌患者外周血中SCCA1的表达水平与临床特征之间的关系,并评估此种检测方法在肺鳞癌外周血中循环肿瘤细胞检测的应用价值。方法收集医院2014-2-1-2014-10-31资料完整的肺鳞癌患者外周血标本28例(确诊为远端转移有11例,未确诊发生转移为17例),另外收集肺炎患者及健康人外周血标本各10例。采用荧光定量RT-PCR的方法检测上述标本中SCCA 1 mRNA的表达量。采用回归分析方法制作定量标准曲线,不同病理分期的肺鳞癌患者基因的表达水平比较采用多个独立样本的K Independent Samples Test检验,阳性表达率比较采用多个独立样本的Kruskal-Wallis H检验。使用ORIGIN 7.5软件绘制散点图并分析。结果1.本实验建立了外周血SCCA 1 mRNA的实时荧光定量RT-PCR检测方法,确定了探针、引物、标准品及对照品,本实验方法特异性与灵敏度较高。2.临床确诊已转移的11例肺鳞癌患者外周血SCCA 1 mRNA全部为阳性,17例临床未确诊转移的患者9例为阳性,8例为阴性,阳性率为71.4%,肺炎患者及正常人检测结果均为阴性,差异具有统计学意义(χ~2=36.456,p<0.05)。3.临床Ⅲ~Ⅳ期肺鳞癌患者外周血中SCCA1 mRNA的阳性率明显高于Ⅰ~Ⅱ期肺鳞癌患者,差异具有统计学意义(χ~2=5.184,P<0.05)。结论1.SCCA1 mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于检测肺鳞癌循环肿瘤细胞中的检测,具有很高的临床应用价值,可用于肺鳞癌患者的早期诊断。2.肺鳞癌患者外周血中SCCA1 mRNA的表达水平与肿瘤是否转移、临床病理分期密切相关,是一项较好的肺鳞癌循环肿瘤细胞的检测指标。