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癌症是全球灾难性的事件，而原发性肝癌是世界上常见的十大恶性肿瘤之一，其死亡率在消化系统肿瘤中列第三位，它起病隐匿，早期缺乏典型症状，自行就诊患者多属于中晚期，手术治疗效果不理想，因而它一直倍受基础及临床科研人员关注。RNAi技术是一种转录后水平的抑制，由FIRE在1998最先发现，是上个世纪最重要的科研成果之一，主要用于信号传导通路相关基因功能的研究。目前，大量资料表明：肿瘤的发生与细胞周期调控的异常有着密切的联系，而细胞周期的调控是一个复杂的过程，伴随着众多因子的参与及精细的复杂的信号转导来决定整个细胞进程。参与细胞周期的重要因子是细胞周期素，细胞周起素依赖性激酶，细胞周期素依赖性激酶抑制因子。这些因子的正常作用是维持一个动态的平衡以确保周期的正常进行。细胞周期的异常会导致异常的细胞增长以致肿瘤。实验研究表明作为调控细胞周期的重要通路Wnt/β-catenin信号传导途径和细胞周期的异常在肝细胞癌中起着重要作用。β-catenin蛋白质是Wnt/β–catenin信号传导途径中的一个重要因子，它在肿瘤的发生及发展过程中起到了重要的作用。研究提示：cyclin A在S期表现活跃，cyclin E、cyclinD在G1/S关卡发挥作用，当沉默β-catenin基因后，细胞周期蛋白cyclin A、cyclin E、cyclin D1的表达会受到影响，但是其它因子在不同的肝癌细胞系中的表达是否发生变化，目前尚未清楚。我们的实验恰好是RNAi技术的实践应用。我们将针对β-catenin的siRNA转染入肝癌细胞HepG2和SMMC-7721后，观察在不同的细胞系对β-catenin蛋白表达的影响，从而进一步观察在不同的时间点不同细胞系的细胞周期、细胞生长及相关周期蛋白的表达。我们将siRNA瞬时转染入肝癌细胞HepG2和SMMC-7721，用Westernblotting检测β-catenin的蛋白质表达，实验发现β-catenin蛋白的表达于72、96小时受到抑制，于96小时的抑制更强。在实验中用流式细胞仪检测两个转染后肝癌细胞系的细胞周期：实验结果发现：转染后两细胞系均在在转染后72小时发生阻滞，停滞在G0/G1期，伴随着时间的推进，于96小时细胞周期往G2/M期推动，细胞周期得以恢复，这很可能是由于其它一些因子补偿了β-catenin蛋白质的表达下降对细胞周期的影响。这恰好可以解释细胞周期于72小时发生阻滞，而于96小时恢复。MTT结果显示：两肝癌细胞系的细胞生长均于72小时受到抑制。由此可见，β-catenin很可能通过调控细胞周期来控制其生长，这与Hu’s研究沉默β-catenin基因后细胞周期会被阻滞在G0/G1是一致的。在实验中，用BCA检测提取蛋白浓度，用Western blotting检测目的蛋白：我们发现cyclin C蛋白表达于72小时增强，96小时恢复，cyclin B1蛋白表达72小时减弱，96小时恢复。这些发现给予我们重要提示：沉默β-catenin基因后可能会导致细胞周期及其相关周期蛋白的变化。因此可以认为Wnt/β-catenin信号传导途径可能通过调控cyclin C和cyclin B1的表达来调控细胞的生长。实验发现当细胞周期于转染后72小时停滞在G0/G1时，增长的cyclin C蛋白加速了细胞从S期到G2期或加速了细胞从G0期到G1期，减少的cyclin B1阻止了细胞从G2到M期或者是阻止了细胞从G1到S期。至于cyclinC和cyclin B1蛋白的异常表达与cyclin A、E、D1之间的关系需要进一步研究。我们的实验初步探讨了Wnt/β-catenin信号传导途径中沉默β-catenin后cyclin C和cyclin B1的表达，而其他相关细胞周期素在沉默β-catenin基因后的变化已有明确的报导及大量的实验研究cyclin A、E、D1，希望我们的实验研究对于肝癌的细胞周期调控提供新的理论及研究方向，进一步探讨肝癌发生的机制，从而为肝癌的治疗提供有效的途径。