在中国肺癌是癌症相关死亡的主要原因，进展期肺癌和远处转移肺癌预后较差，持续增高的死亡率使得研究新型治疗手段迫在眉睫。研究显示，肺癌最常见的病因是吸烟、大气污染和物理化学致癌因子的接触、慢性肺部炎症性疾病、原癌基因的激活与抑癌基因的失活。随着人们对肿瘤生物学的更好的理解使得宣告个体化医疗时代的靶向治疗得以发展,多种基因突变的靶向抑制剂相继发现。在过去的几年中，ALK抑制剂(crizotinib,ceritinib和alectinib)已经成为ALK融合突变阳性NSCLC患者的治疗方法。新一代ALK抑制剂Brigatinib在含有棘皮动物微管结合蛋白4-间变性淋巴瘤激酶（EML4-ALK）基因重组阳性NSCLC患者中展现出更加惊人的前景，成为新型有效的治疗手段。　　目的：本课题探讨在Brigatinib诱导的EML4-ALK融合基因阳性的非小细胞肺癌H2228细胞株中，PI3K/AKT/mTOR信号通路相关基因及蛋白表达差异及细胞生长差异的改变。　　方法：根据不同实验要求使用不同浓度的布格替尼处理ALK阳性的非小细胞肺癌细胞株H2228，采用噻唑蓝（MTT）方法检测不同浓度的Brigatinib对非小细胞肺癌H2228细胞的抑制率，计算IC50;采用流式细胞术检测不同浓度Brigatinib（25nM100nM400nM）对H2228细胞株凋亡百分率的影响；采用流式细胞术检测H2228细胞在100nM Brigatinib作用下细胞周期的改变；通过蛋白质免疫印迹（western blot）和实时定量PCR技术来检测不同浓度Brigatinib（25nM100nM400nM）作用H2228细胞24小时后，观察非小细胞肺癌H2228细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路相关基因及蛋白的表达差异。　　结果：结合MTT结果显示ALK抑制剂Brigatinib在非小细胞肺癌H2228细胞系中的IC50是115.9nM，具有抑制细胞增殖作用，具有浓度依赖性，随Brigatinib药物浓度的增加，H2228细胞增殖能力随之下降，与对照组相比具有统计学意义（p＜0.05）。流式细胞术检测结果显示Brigatinib（25nM100nM400nM）对H2228细胞株有促凋亡的作用，且呈浓度依赖性，与对照组相比具有统计学意义（p＜0.05）；流式细胞术检测结果显示Brigatinib能使H2228细胞株阻滞于G1期，与对照组相比具有统计学意义（p＜0.05）。Western blot以及qRT-PCR结果显示，与未加入ALK抑制剂Brigatinib的H2228细胞系对照组相比，使用不同浓度Brigatinib的H2228细胞株中PI3K/AKT/mTOR信号通路下游蛋白及基因表达减少，有浓度依赖性，具有统计学意义（p＜0.05）。　　结论：综上所述，本课题中探索验证了Brigatinib对H2228细胞株有抑制增殖和促进凋亡的作用，并且其作用具有浓度依赖性。这项实验验证了，ALK抑制剂Brigatinib诱导非小细胞肺癌H2228细胞系的增殖和凋亡能力可能与PI3K/AKT/mTOR通路相关基因及蛋白的表达有关，并且能够下调p-ALK、p-PI3K、p-AKt和p-mTOR蛋白的表达。这表明，PI3K/AKT/mTOR信号通路在Brigatinib诱导的EML4-ALK融合基因阳性的非小细胞肺癌的肿瘤进展过程中具有潜在的临床意义。在本实验中，ALK抑制剂Brigatinib表现出了它显著的抗肿瘤生长的效果。