农杆菌介导草坪植物抗除草剂基因的遗传转化研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weishuren33
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草坪植物在人类生活中的地位越来越重要,筛选与培育优良的草坪植物新品种是草坪业的重要任务之一。长期以来,国内外学者利用引种驯化、杂交育种等育种手段,围绕改良草种耐寒、耐热与抗病等性状,已经选育出了大量优良品种,但这种传统育种方法存在着育种周期长、优良组合的预见性差、遗传连锁累赘难以打破等缺点。以分子遗传学为理论基础的转基因技术,为植物的遗传改良提供了一条新的分子育种途径。将遗传转化的转基因技术与传统育种手段相结合,不仅可以拓展草种改良的范围,而且也有助于解决一些常规育种方法难以解决的特殊问题,为草坪植物改良和新品种选育打开一个崭新的局面。 同大多数农作物如水稻、玉米、小麦等一样,杂草在草坪建植和种子生产过程中有着极大的危害,往往要耗费大量的人力财力,但效果却并不明显。通过基因工程培育抗除草剂草坪植物,可以节省大量费用,便于机械化以及扩大高效与超高效除草剂品种的应用范围,解决除草剂残留的问题,是目前最为经济有效的一种手段。本文对高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)和马蹄金(Dichondra repens Forst.)两类具有代表性的草坪植物进行了组织培养与植株再生的研究,采用农杆菌介导法对马蹄金进行了遗传转化试验,并获得了以下研究结果: 1 高羊茅成熟胚离体培养及高频植株再生 以“佛浪(Finelawn)”、“王朝(Dynasty)”、“野马Ⅱ号(Mustang Ⅱ)”、“宾狗(Bingo)”、“交战Ⅱ号(Crossfire Ⅱ)”和“凌志(Barlexas)”6个高羊茅品种的成熟种子为外植体,采用均匀设计研究了不同生长调节剂、基因型和培养基对愈伤组织诱导的影响。结果表明:2,4-D对高羊茅成熟种子萌芽及愈伤组织诱导的影响极大;基因型对愈伤组织诱导有一定影响;培养基对愈伤组织诱导无任何影响;愈伤组织在不添加任何生长调节剂的培养基上即可进行分化。高羊茅最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6+18mg/L 2,4-D,外植体为“王朝”的成熟种子,其愈伤组织诱导率为95.60%,且分化率达100%。 2 马蹄金离体培养及高频植株再生 以马蹄金下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,采用正交设计法研究了生长调节剂2,4-D、6-BA、KT和α-NAA对其愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同外植体在含有不同生长调节剂的诱导培养基中进行离体培养时,均可诱导出愈伤组织且
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