论文部分内容阅读
目的观察硫化氢对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、肾组织活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）水平及肾组织中足细胞podocalyxin蛋白以及mRNA表达的影响，探讨硫化氢降蛋白尿以及肾保护的可能机制。方法腹腔内注射链尿佐菌素构建糖尿病肾病大鼠动物模型，造模成功后将大鼠随机分为糖尿病肾病模型组（D组）和硫化氢治疗组（H组），并设置正常对照组（N组）。H组每日腹腔注射0.25mL NaHS(56μmmol·L-1·kg-1)，N组、D组注射0.25mL无菌注射用水。给药8周后检测血生化指标、24小时尿蛋白定量，荧光探针标记后激光共聚焦显微镜扫描测定活性氧簇，免疫组化、免疫荧光和实时定量PCR（real-time quantitative polymerase chainreaction, RT-PCR）检测肾组织podocalyxin蛋白以及mRNA的表达。结果1.硫化氢对糖尿病肾病大鼠24小时尿蛋白定量以及肾功能的影响：与N组相比，D组和H组的24小时尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮等水平明显增加，且D组增加较H组更明显（P<0.05）。2.硫化氢对糖尿病肾病大鼠肾脏组织足细胞分子podocalyxin蛋白表达的影响：与N组相比，D组肾小球PCX蛋白表达显著下降（P<0.05），H组肾小球PCX蛋白表达也下降，但不明显（P>0.05）；与D组相比，H组肾小球PCX蛋白表达增加（P<0.05）。3.硫化氢对糖尿病肾病大鼠肾脏组织足细胞分子podocalyxin mRNA表达的影响：与N组相比，D组和H组podocalyxin mRNA表达明显降低（P<0.05），且D组降低较H组更明显（P<0.05）。4.硫化氢对糖尿病肾病大鼠肾脏组织ROS水平的影响：与N组相比，D组和H组的ROS水平明显增加，且D组表达增加较H组更明显（P<0.05）。5.糖尿病肾病大鼠24小时尿蛋白定量、糖尿病肾病大鼠肾组织ROS以及podocalyxinmRNA水平的相关性分析：ROS与24小时尿蛋白定量呈正相关（r=0.546, P<0.01）。Podocalyxin mRNA表达与24小时尿蛋白定量呈负相关（r=-0.375，P<0.05）。Podocalyxin mRNA与ROS表达呈负相关（r=-0.678，P<0.01）。结论硫化氢可能通过抑制糖尿病肾病大鼠的氧化应激反应，减少足细胞podocalyxin表达的缺失，减少糖尿病肾病大鼠蛋白尿，从而起到肾保护作用。