喜树碱对结肠癌细胞系诱导性一氧化氮合酶合成的影响

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喜树碱,是一种从喜树的枝干中提取的生物碱,被认为是一种有效的抗肿瘤药物。其抗肿瘤谱广泛,抗肿瘤作用的原理复杂,其中最主要的是因为其作为拓扑异构酶1抑制剂而抑制DNA的合成。近来,有新的研究发现,其抗肿瘤的效应还可能和其他作用途径有关,比如抑制血管生成,诱导肿瘤细胞凋亡等。 许多研究表明诱导性一氧化氮合酶(iNOS)在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中起相当重要的作用。在许多实体肿瘤中,iNOS过度表达。而且,iNOS的活性也和肿瘤的分级和细胞的分化有密切的关系。近来有研究显示,喜树碱能影响病毒转染的鼠巨噬细胞样细胞系RAW264.7的iNOS蛋白质的表达和活性。而喜树碱是否能影响肿瘤细胞iNOS的表达,国内外尚无报道。 本实验通过观察喜树碱对人结肠腺癌SW480细胞系一氧化氮(NO)的产量、iNOS mRNA和蛋白质表达的影响,探讨喜树碱抗肿瘤效应的可能的相关机制。 实验方法 1.SW480细胞的培养 (1)常规传代培养 生长至对数生长期的SW480细胞经胰蛋白酶消化后以一传三的比例接种于100mL培养瓶中,放入37℃、5%CO2的细胞培养箱培养,细胞贴壁后小心弃去旧培养基,每瓶加新鲜的DMEM培养基10mL继续培养,以备实验使用。 (2)实验细胞的准备 ①测定NO生成量的实验细胞准备
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