细胞培养中的细菌和支原体污染,特别是支原体污染一直都是细胞培养的难题。污染了细菌和支原体的细胞,虽然一般选择废弃,但有些重要的细胞依然需要靠清除污染来挽救。鉴于细胞培养的污染清除中存在的诸多问题,本研究以BHK-21细胞、抗菌药Baytril、大肠杆菌、猪鼻支原体为研究对象,用96孔细胞培养板,采用10倍分级稀释法,测出抗菌药Baytril对BHK-21细胞的最小抑制浓度为60-80PPM。用同样方法,测出Baytril对大肠杆菌的最小抑菌浓度是1PPM。而Baytril对猪鼻支原体的最小抑菌浓度是0.5-2PPM[63],所以选定了10PPM这个即不影响BHK-21细胞,又可以抑制大肠杆菌和猪鼻支原体的Baytril浓度来做进一步的实验。在细菌部分的实验里,用含10PPM的抗菌药Baytril的MEM生长液,对用大肠杆菌人工污染的BHK-21细胞里,通过洗涮、冲洗、重点冲洗、刮出、消化、贴壁后再冲洗等循环往复的处理等办法。在抗菌药Baytril的保护下,大幅度地稀释大肠杆菌在细胞群里面的浓度,同时也在用无抗菌药的培养液做大肠杆菌的监测。监测显示,进行到第4个清污循环时,BHK-21细胞里大肠杆菌的污染已经被彻底清除。在支原体的的实验里,人为感染猪鼻支原体的BHK-21细胞,同样是用含10PPMBaytril抗生素的MEM生长液,同样采用和清除大肠杆菌基本相同的方法。用DNA荧光染色法和PCR法对猪鼻支原体的清除进行不断监测,结果发现,同样是到了第4轮循环,BHK-21细胞就脱离了支原体的污染,并且PCR法比起DNA荧光染色法要敏感得多。最后通过生物统计学里的配对资料符号检验法检验后得出,本方法对清除BHK-21细胞系中的大肠杆菌、猪鼻支原体感染具有极显著的效果。