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铁是人体所必须的一种微量元素,参与人体多种生理代谢活动,包括多种蛋白及关键代谢酶的组成以及电子的传递。正常生理条件下,体内铁代谢处于一个平衡状态,当铁代谢失衡时,就会引起体内铁的缺失或是积聚。过量的铁积聚会引起细胞氧化应激加剧及炎症等多种毒性反应,造成细胞的功能紊乱甚至死亡,从而对机体造成进一步的损害。在AD(Alzheimer’s Disease,阿尔茨海默病)、PD(Parkinson’s Disease,帕金森)等NDs(Neurodegenerative Diseases,神经退行性疾病)中常发现有铁积聚及神经炎症伴随存在的现象,因此减少铁的积聚及抗氧化反应成为治疗AD、PD等神经退行性疾病的一个有效途径。目前治疗铁积聚的药物包括去铁胺、去铁酮等都有极大的副作用。ASA(Acetylsalicylic acid/aspirin,阿司匹林)是一类非甾类抗炎药,广泛用于抗炎、抗风湿及治疗疼痛等多种疾病中,并且具有神经保护作用。在最新的研究中,ASA可以调节生理及炎症情况下小鼠小胶质瘤BV-2细胞相关铁代谢蛋白的表达,从而改变细胞内的铁含量。目的:本课题研究ASA在生理及炎症情况下对PC-12细胞铁代谢相关蛋白表达的影响,探索其相关作用途径,了解ASA在AD等神经退行性疾病炎症情况下所发挥有益作用的潜在机制。方法:本课题选用大鼠肾上腺素能神经肿瘤嗜铬细胞瘤细胞系PC-12细胞作为研究对象,用IL-6(Interleukin-6,白介素-6)刺激后制作炎症模型。采用MTT(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide),((3-3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)法检测ASA在生理及炎症情况下对PC-12细胞活力的影响;WB(Western Blotting,蛋白印迹)法检测在生理和炎症条件下ASA对Fpn1(Ferroportin1,膜铁蛋白1)、Ft-L(Ferritin light chain,储铁蛋白轻链)、Tf R1(Transferrin Receptor1,转铁蛋白受体1)等铁代谢相关蛋白表达的影响以及对JAK2(Janus kinase 2,JAK激酶2)、STAT3(signal transducer and activator of transcription 3,信号诱导和转录激活酶3)蛋白的磷酸化作用;Real-time PCR(Real-time quantity PCR,荧光实时定量PCR)法检测ASA对生理和炎症条件下hepcidin基因表达的影响。结果:MTT表明,生理条件下,各浓度ASA对PC-12细胞活力都无明显影响;炎症条件下,ASA可以改善由IL-6导致的细胞活力下降,1m M ASA具有明显的改善作用(P<0.05);WB显示,生理条件下,ASA可以明显提高Fpn1的表达(P<0.01),对Tf R1、Ft-L、p STAT3(Phosphorylation STAT3,磷酸化STAT3)、pJAK2(Phosphorylation JAK2,磷酸化JAK2)的表达无明显影响;炎症条件下,ASA能显著抑制由IL-6刺激引起的Fpn1的低表达(P<0.01)以及Ft-L(P<0.01)、pSTAT3(P<0.05)、p JAK2(P<0.05)的高表达;Real-time PCR结果显示,ASA在生理条件下对Hepcidin基因的表达无明显改变;炎症条件下,ASA可以显著抑制Hepcidin m RNA的高表达(P<0.05)。结论:ASA可以抑制由炎症因子引起的PC-12细胞相关铁代谢蛋白的变化以及细胞活力的下降。炎症条件下,ASA可通过IL-6/JAK2/STAT3途径负向调节Hepcidin的表达,从而提高Fpn1的表达,增强细胞铁输出能力,从而减少细胞内的铁积聚,并减少由此造成的细胞毒性损伤。