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一、目的：通过观察胰岛素信号转导中磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）抑制剂沃曼青霉素（wortmannin）诱导胰岛素抵抗（IR）后关键信号葡萄糖转运蛋白4（Glut4）、丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）基因表达的调节，探讨IR信号传导分子机理；研究胰岛素样生长因子（IGF-I）刺激作用下对猪卵巢胰岛素抵抗与正常颗粒细胞性激素生成及细胞色素芳香化酶（P450arom）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）和类固醇激素急性调节蛋白（StAR）mRNA的影响；中西药胰岛素增敏剂曲格列酮、二甲双胍和小檗碱、丹参酮对IR的影响。二、方法：对猪卵巢颗粒细胞进行体外培养，用PI-3K抑制剂wortmannin诱导IR模型，以氚三标记葡萄糖检测细胞中的糖元量，葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量，以化学发光法测定培养液中雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）的水平，以免疫荧光对Glut4、MAPK、PEARγ蛋白定性分析，以Western Blot对Glut4、PEARγ蛋白表达定量分析，以逆转录—聚合酶链反应（RT-PCR）对Glut4、MAPK、P450scc和StAR mRNA半定量分析，以实时荧光PCR对P450arom、PEARγ定量分析。三、结果：（1）浓度为1.5μmol／L的wortmannin显著降低了细胞对葡萄糖的摄取（P＜0.05），残糖量增多约13.76％。（2）荧光免疫组化显示Glut4、MAPK蛋白有表达，主要在细胞浆着色，PEARγ主要在细胞浆和细胞膜着色。（3）IGF-1可刺激正常和IR颗粒细胞的E2分泌增加均P＜0.05，而且与空白对照组和空白加IGF-1组之间的差距相比，IR组和IR加IGF-1组之间的差距缩小。与空白对照组相比IR组T水平升高（P＜0.05），空白加IGF-1组T水平降低（P＜0.05），IR加IGF-1组T水平降低，无统计学意义（P＞0.05）；而且与空白对照组和空白加IGF-1组之间的差距相比，IR组和IR加IGF-1组之间的差距增大。（4）P450scc和StAR的mRNA显示空白加IGF-1组比空白对照组表达升高，而IR加IGF-1组和其它各组比明显升高。P450arom的Ct值显示空白加IGF-1组的颗粒细胞P450arom水平比空白对照组升高，IR加IGF-1组则比其它各组明显降低。（5）Glut4的蛋白表达在卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗时低表达MAPK、PPARγ的蛋白表达在卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗时高表达。（6）中西药胰岛素增敏剂曲格列酮、二甲双胍和小檗碱、丹参酮对IR作用后其Glut4蛋白和mRNA表达升高，但低于正常组；中西药胰岛素增敏剂作用后MAPK、PPARγ蛋白表达降低，但高于正常组。四、结论：（1）wortmannin阻断PI-3K信号转导产生IR，关键信号Glut4表达下降影响新陈代谢信号通路，产生IR，而MAPK水平升高，进而影响有丝分裂信号通路，说明卵巢中存在交替的胰岛素信号通路。（2）首次提出应用通过PI-3K抑制物Wortmannin诱导胰岛素抵抗的造模的方法，引起胰岛靶组织对葡萄糖的摄取和利用减少，通过氚三标记葡萄糖及葡萄糖氧化酶法得到验证。（3）IGF-1刺激了颗粒细胞P450arom、StAR、P450sccmRNA的表达，引起雌激素分泌的增加。IR以后IGF-1的干预刺激雄激素的合成和分泌，StAR、P450scc的表达明显增加了。（4）提出IGF-I在卵泡发育中的作用和细胞内的信号传导系统及卵巢微环境中激素与局部生长因子之间的相互调控作用。（5）丹参酮和小檗碱降糖的作用特点类似曲格列酮和二甲双胍。（6）“痰壅胞宫”生物学基础是糖代谢异常；“痰壅胞宫”的效应是引起甾体激素变化。深入到卵巢细胞内分子水平探讨IR信号传导分子机理及中西药胰岛素增敏剂改善IR的分子机制。此研究有助于阐明有关IR的发病机制，尤其是其分子靶点及细胞内信号机制及为预防和控制PCOS，改善IR的必要性提供了证据，为传统中药的临床应用提供了新的思路。