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目的：原发性喉癌指原发部位在喉部的肿瘤,以鳞状细胞癌(90%)最为常见。喉癌治疗包括手术、放疗和化疗等多种治疗方法。根据病情的分期可选择一种,或多种方法相结合的治疗方式。环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2, COX-2),是催化花生四烯酸合成前列腺素(Prostaglandin, PG)过程中的关键酶,在体内存在COX-1和COX-2两种同工酶。近年来大量研究表明COX-2在多种肿瘤中都存在异常增高表达,在其发病过程中发挥着重要作用。关于COX-2在肿瘤中的作用机制,目前研究表明其可以通过多种途径作用于肿瘤发病过程。前期实验已经证实选择性COX-2抑制剂尼美舒利(nimesulide, NIM)可以通过诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖的途径抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长。本实验进一步就NIM对喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤微血管密度(Microvessel density, MVD)、COX-2、血管生成因子-2(Angiopoietin-2, Ang-2)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)表达的影响进行观察和研究,以期进一步为NIM用于喉鳞癌的治疗提供理论依据。方法：粱灼萍等在前期试验中,将喉鳞癌Hep-2细胞接种于裸鼠背部皮下,建立移植瘤模型。将裸鼠随机分为实验组和对照组各六只,实验组予裸鼠腹腔注射NIM(50mg/kg/2d,0.2ml);对照组予裸鼠腹腔注射0.2ml生理盐水。用药4周后,处死裸鼠并获得瘤体。本实验选用粱灼萍实验所获得的喉癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤,运用免疫组织化学技术检测CD31在喉癌裸鼠移植瘤组织中表达来定位瘤体中的MVD,运用图像分析系统作平均光密度值测定,并比较两组间的差异；分别采用免疫组织化学染色技术检测喉癌裸鼠移植瘤组织中COX-2、Ang-2和bFGF蛋白的表达情况,运用图像分析系统计算平均光密度值并比较实验组与对照组中COX-2、Ang-2、bFGF蛋白表达情况；采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测喉癌移植瘤组织中COX-2, Ang-2和bFGF mRNA的表达,并对两组移植瘤组织中COX-2、Ang-2和bFGF mRNA灰度值进行比较；运用直线相关分别分析实验组中COX-2、Ang-2、bFGF蛋白表达水平与MVD值的相关性。结果：(1)免疫组织化学SP法检测裸鼠移植瘤中CD31表达得到平均MVD值,实验组为12.83±3.06,与对照组25.50±4.85(t=-5.412,P<0.05)相比有统计学意义,表明选择性COX-2抑制剂NIM干预后移植瘤内血管生成减少；(2)利用免疫组织化学SP法检测裸鼠移植瘤组织中COX-2、Ang-2、 bFGF蛋白表达,实验组中COX-2蛋白表达光密度为(38.12+15.56),与对照组(140.92±23.12)比较显著下降,差异有统计学意义(t=-9.825,P<0.05),实验组Ang-2蛋白表达为(49.02±7.67),经统计学分析与对照组(110.04±6.76)比较差异有统计学意义(t=-14.607,P<0.05)；实验组bFGF蛋白表达为(62.25±7.50),经统计学分析与对照组(119.04±17.30)比较差异有统计学意义(t=-7.391,P<0.05)；(3)运用RT-PCR技术检测移植瘤中COX-2、Ang-2和bFGF mRNA表达,NIM治疗组COX-2mRNA表达为(0.70±0.18),对照组为(2.20±0.38),经统计学分析差异有统计学意义(t=-9.825,P<0.05)；NIM治疗组Ang-2mRNA灰度值为(0.49±0.03),对照组为(0.98±0.10),经统计学分析差异有统计学意义(t=-11.509,P<0.05)；NIM治疗组移植瘤中bFGF mRNA表达为(0.65±0.08),对照组为(1.19±0.19),经统计学分析差异有统计学意义(t=-6.209,P<0.05)。(4)相关性分析：运用直线相关分析方法分别检测实验组移植瘤组织中COX-2、Ang-2、bFGF蛋白表达水平与MVD相关性,经统计学分析存在相关性,其相关系数r分别为0.832,0.944,0.844(P均<0.05)。结论：(1)选择性COX-2抑制剂NIM可以抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤中血管生成；(2)实验组中COX-2、Ang-2、bFGF蛋白表达水平分别与MVD表达水平呈正相关,后两者为血管生成促进因子,其与MVD的相关性表明其在肿瘤血管生成中作用显著；(3)使用NIM后,移植瘤组织中Ang-2和bFGF蛋白及mRNA表达水平都降低,表明NIM抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤血管生成的机制可能与抑制Ang-2及bFGF表达有关；(4)选择性COX-2抑制剂NIM可通过多种机制抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤的生长,有望为未来喉鳞癌综合治疗提供新的思路和手段。