白藜芦醇降低人脐带间质干细胞IL-6和VEGF分泌及其预处理上清抑制肿瘤细胞迁移

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目的:本研究旨在探讨白藜芦醇(Resveratrol,RES)对人脐带间质干细胞(human umbilical cord msenchymal stem cells,hucMSCs)分泌细胞因子的影响,以及白藜芦醇预处理hucMSCs的条件培养基(RES-hucMSCs-CM)对肿瘤细胞形态、增殖、凋亡和迁移方面的作用及其机制。  方法:采用组织块贴壁生长的方法分离培养人脐带间质干细胞(hucMSCs),收集白藜芦醇处理hucMSCs的上清、蛋白及RNA,应用ELISA、Luminex、Western blot、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光等技术方法分析白藜芦醇对hucMSCs的影响。通过ELISA技术检测白藜芦醇预处理hucMSCs的条件培养基(RES-hucMSCs-CM)中IL-6的变化。RES-hucMSCs-CM作用于肿瘤细胞(A549和H446),显微镜下观察其形态变化,细胞活力检测试剂盒检测细胞的增殖,流式PI/AnnexinⅤ双染法检测细胞的凋亡,Transwell迁移实验检测细胞的迁移,Western blot检测磷酸化STAT3(p-STAT3)、总STAT3(t-STAT3)的表达水平。  结果:白藜芦醇直接作用于hucMSCs,降低hucMSCs中IL-6和VEGF的分泌,特别是IL-6,同时也降低了IL-6和VEGF mRNA水平的表达,增强PDGFR-β1的表达,但对PDGF-D和TGFβ1没有明显的影响。RES-hucMSCs-CM中IL-6的表达水平降低,RES-hucMSCs-CM对肿瘤细胞A549和H446的形态、增殖和凋亡都没有显著的影响,但能明显抑制A549和H446细胞的迁移。此外,Western blot的结果显示RES-hucMSCs-CM处理A549细胞后其p-STAT3的表达水平下降。  结论:白藜芦醇降低hucMSCs中IL-6和VEGF的分泌,增强PDGFR-β1的表达水平。白藜芦醇预处理hucMSCs的条件培养基(RES-hucMSCs-CM)通过降低IL-6的分泌、减弱磷酸化STAT3的活化发挥抑制肿瘤细胞迁移的作用。我们的研究首次发现白藜芦醇通过降低hucMSCs细胞因子IL-6的分泌来影响hucMSCs上清中的构成并发挥抑制肿瘤细胞迁移能力的作用。白藜芦醇改变了间质干细胞上清的构成,这为间质干细胞作为肿瘤靶向治疗的载体提供了一个新的思路。
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