免疫组化方法在鸡马立克氏病和禽白血病诊断中的应用研究

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本研究利用特异性的抗体,运用免疫组织化学检测方法-SP法,对马立克氏病病毒(MDV)和禽白血病病毒(ALSV)强毒感染SPF鸡的多种组织进行检测,试验证明,SP法适用于MDV和ALSV感染鸡组织中相应抗原的检测,能够为临床诊断提供病原学依据。主要结果如下: 1.用液氮保存的京-1株MDV强毒感染2日龄SPF鸡,复制出典型的马立克氏病(MD),于17日龄左右开始发病、死亡,大体病变主要出现在肝、脾、腺胃和肾脏中;用冻干RAV株ALSV强毒经同样的途径感染同一日龄SPF鸡,在12周内未复制出典型的禽白血病(AL),但感染成功。 2.利用对MDV有特异性的鼠抗鸡MDV-gB单克隆抗体和对ALSV有特异性的兔抗鸡ALV-p27IgG,运用SP法分别检测阴、阳性鸡全血涂片和组织石蜡切片中的MDV-gB抗原(MDV-gBAg)和ALV-p27群特异性抗原(ALV-p27gsa),有良好的特异性。 3.将SP法与ELISA法进行比较,在检测阳性鸡血液中的ALV-p27gsa时,前者的敏感性至少是后者的4倍。 4.用SP法检测阳性鸡心、肝、脾、肺、肾、腺胃、法氏囊石蜡切片和全血涂片中的ALV-p27gsa,所有组织中都有阳性物质,阳性物质除了大量存在于心肌细胞浆或部分肾小管上皮细胞浆中外,一般存在于组织中的少量白细胞样细胞中;全血涂片的阳性率为93.33%,阳性物质也存在于少量白细胞样细胞中。 5.用SP法检测阳性鸡心、肝、脾、肺、肾、腺胃、法氏囊及皮肤石蜡切片和全血涂片中的MDV-gBAg,以肝、脾、肺和皮肤的检出率为最高(达100%),腺胃和法氏囊的次之(为88.89%),肾和心的较低(分别为33.33%和22.22%)。阳性物质主要存在于白细胞样细胞中。 6.本研究首次将免疫组织化学检测方法-SP法运用于全血涂片中MDV-gBAg和ALV-p27gsa的检测,研究证明其敏感性分别可达85.19%和93.33%,因此,SP法可用于活鸡MDV和ALSV感染的诊断。
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