硫酸软骨素是从动物软骨组织提取的一种酸性粘多糖,由不同硫酸化的D-葡糖醛酸(GlcA)和N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)二糖单元组成。硫酸软骨素具有抗炎、抗凝血、抗动脉粥样硬化、抗病毒性肝炎等活性,广泛应用于骨科、眼科、心脑血管科、生物医学等。硫酸软骨素来源多样、结构不一、应用广泛,控制好硫酸软骨素的质量至关重要。硫酸软骨素(供口服)用原料的标准收载于2015年版中国药典,EP、USP、BP也收载了硫酸软骨素(供口服用)原料的标准。而硫酸软骨素注射剂为我国特有品种,国内外药典均未收载注射剂的标准。目前水针标准为国家药品标准第九册收载,粉针标准还未统一,企业均执行各自注册标准。相对于口服制剂,注射剂存在更高的安全风险,但是国内注射用原料药质量标准较口服用原料药低,亟需要提高。本文共分为以下四个部分的内容:第一部分、种属来源分析。质量标准规定本品原料均来自于猪软骨,如果混入其他来源,由于不同种属来源病毒灭活工艺验证内容有所不同,该药品作为注射剂使用,将会带来安全风险。本文对不同来源硫酸软骨素的比旋度、二糖组成进行了研究,尝试建立硫酸软骨素来源鉴别的分析方法。不同来源硫酸软骨素的比旋度和二糖组成存在差异,其中,4S/6S是区分不同来源硫酸软骨素的一个重要指标。第二部分、含量测定方法的建立。含量测定是反映产品有效性和生产工艺稳定性的重要指标。现行标准中的咔唑法和Elson-Morgan法准确度差、灵敏度差、操作繁琐、重复性不好。本文参照中国药典2015年版二部中硫酸软骨素(供口服用)原料项下含量测定方法,建立了注射剂的酶解液相色谱法并对该方法进行方法学的验证。与原测定方法相比,该方法具有专属性好、操作简单、重复性好的优点。第三部分、杂质研究。硫酸软骨素由猪软骨经提取纯化而得,生产工艺中可能会残留其他粘多糖、有机溶剂、蛋白等杂质。本文首次建立了硫酸软骨素有关物质的醋酸纤维素薄膜电泳法和高效液相法,并对比了两种方法的优缺点。参照中国药典2015年版二部中硫酸软骨素(供口服用)原料项下残留溶剂的测定方法,建立了注射用原料的乙醇的气相色谱分析方法。采用Lowry法对注射用原料的残留蛋白进行了考察。第四部分、分子量及分子量分布研究。多糖的分子量与分子量分布影响到多糖的理化性质与活性,也是反映原料生产工艺稳定性以及临床用药安全有效性的重要指标。现行标准的SEC-HPLC法采用的对照品不合理致使其测定结果与SECMALLS法的结果相差较大。为能够采用SEC-HPLC法准确测定硫酸软骨素的分子量及分子量分布,需要筛选分子量对照品,本文优化了SEC-HPLC法,并将该方法用于对硫酸软骨素分子量对照品的筛选。本文从种属来源、含量测定、杂质分析和分子量及分子量分布四个方面对硫酸软骨素质量标准进行了研究。研究内容对提高硫酸软骨素的质量标准提供了依据和参考。