毛细管电泳在中药及其煎煮液分析中的应用

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中药成分复杂,分析其有效成分比较困难。如何保证药品质量、提高药物疗效是亟待解决的问题。为了控制药物质量,发现新的药物有效成分,越来越多的分析手段已用于分离和分析中药的活性成分。近年来对中药煎煮过程中有效成分的研究已取得了很大的进步,但距现代化的要求还有很大的差距。毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)是一种新型的分离分析技术,具有高效、快速、进样体积小、可选择的分离模式多、方法简单等优点;而流动注射和毛细管电泳联用技术(Flow injection-capillary electrophoresis,FI-CE)是近几年研究的热点,在进样和样品预处理方面有强大的优势。鉴于这种情况,本论文从理论和方法上开展了毛细管电泳在中药及其煎煮液分析方面的研究工作。本论文第二部分充分利用毛细管电泳及流动注射-毛细管电泳联用的优势,对中药浸泡和煎煮过程中活性组分的浓度变化进行了测定,取得了以下几方面创新性的研究成果:1.建立了同时分离中药甘草根中的甘草次酸和甘草酸的自由溶液毛细管电泳新方法。并且将该方法用于离线测定甘草根浸泡和煎煮过程中不同时间时甘草次酸和甘草酸的含量变化。2.利用FI高精度进样和强大的样品预处理能力,首次将在线过滤和冷却装置与FI-CE联用,并应用到中药甘草根煎煮过程中有效成分浓度的动态变化研究。3.将微乳液毛细管电动色谱用于中药蛇床子中欧前胡素和蛇床子素的分离与测定,结果令人满意。本论文共分为三部分五章:第一部分:综述第一章:简单介绍了CE的原理和特点、毛细管电泳在中药及其煎煮液分析中的应用。第二部分:毛细管电泳在中药活性成分分析中的应用第二章:建立了同时分离测定甘草根中甘草次酸和甘草酸的自由溶液毛细管电泳新方法。最佳分析条件为:10 mM硼砂,pH 8.80,分离电压20 kV,检测波长254 nm。该方法已用于甘草根离线浸泡和煎煮过程中甘草次酸和甘草酸含量的变化研究,并获得了最佳浸泡和煎煮时间,而且对其它中药煎煮过程中有效成分含量的研究也具有重要的参考价值。第三章:通过FI强大的样品预处理能力,实现了样品的在线过滤和冷却,建立了一种在线监测甘草根煎煮过程中有效成分动态变化的新方法。最佳分析条件为:10 mM硼砂,pH 8.80,分离电压为10 kV,检测波长为268 nm。通过对甘草根煎煮液的在线监测,得到了甘草根的最佳煎煮时间,而且发现在甘草根煎煮过程中,没有新成分出现,原有的成分也没有消失。将该方法进行改善,可用于其它中药煎煮过程中活性成分的在线测定。第四章:建立了一种简单、快速、灵敏、准确的微乳液毛细管电动色谱法,同时测定了中药蛇床子中的欧前胡素和蛇床子素。最佳分析条件为:20 mM Tris,20%(v/v)微乳(16.55%(w/v)SDS+40.75%(v/v)正丁醇+5.85%(v/v)正庚烷+36.85%(v/v)水),分离电压15 kV,检测波长254 nm。第三部分:毛细管电泳在手性分离中的应用第五章:建立了一种简单、灵敏、准确的自由溶液毛细管电泳新方法,用β-CD为手性选择试剂,分离了盐酸帕洛诺司琼对映体。最佳分析条件为:30 mMNaH2PO4,10%甲醇,150 mMβ-CD,pH=3.0,分离电压为15 kV。
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