目的：研究高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏中线粒体融合蛋白2(Mitofusin2：Mfn2)的表达及线粒体结构和功能的变化情况；以明确Mfn2的表达与线粒体结构、功能的关系，为研究胰岛素抵抗的分子机制提供实验依据。方法：本研究以4周龄SD大鼠为研究对象，适应性喂养1周后随机分为正常饮食组20只和高脂饮食组20只。1通过高脂饲料喂养SD大鼠构建胰岛素抵抗的动物模型：正常饮食组给予普通饲料(热量组成：脂肪10.3%,蛋白质24.2%,碳水化合物65.5%,总热量为348kcal/100g)；高脂饮食组给予高脂饲料(热量组成：脂肪59.8%,碳水化合物20.1%,蛋白质20.1%,总热量为501kcal/100g)。2在喂养4周时，每组随机选取10只大鼠行高胰岛素正葡萄糖钳夹实验检测胰岛素抵抗程度，钳夹实验结束后进行下述指标检测。2.1常规指标检测：采用葡萄糖氧化酶法测尾尖空腹血糖；采用酶联免疫法测血清中空腹胰岛素的水平；采用生化法测血清中胆固醇和甘油三酯的含量。2.2线粒体结构功能检测：采用HE染色观察肝脏细胞形态变化；采用透射电镜观察肝脏线粒体结构变化；采用比色法测定肝脏组织线粒体悬液中琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶的活性。2.3Mfn2检测：采用Real-time RT-PCR检测肝脏中线粒体融合蛋白2的mRNA表达情况；采用Western blot检测肝脏中线粒体融合蛋白2的蛋白含量。3继续喂养剩余的大鼠到8周时，再次行高胰岛素正葡萄糖钳夹实验检测胰岛素抵抗程度，钳夹实验结束后处死剩余的大鼠，重复上述指标检测。结果:1喂养4周后高胰岛素正葡萄糖钳夹实验结果显示：高脂饮食组葡萄糖输注率24.25±0.87mg/(kg.min)低于正常饮食组25.20±0.61mg/(kg.min)，差异有统计学意义（P <0.05）；两组大鼠体重、空腹血糖、胆固醇及甘油三酯含量差异无统计学意义（P>0.05）；高脂饮食组空腹胰岛素的含量28.08±0.65mU/L高于正常饮食组26.30±0.85mU/L，差异有统计学意义（P﹤0.01）。2喂养8周后高胰岛素正葡萄糖钳夹实验结果显示：高脂饮食组葡萄糖输注率19.39±0.88mg/(kg.min)低于正常饮食组24.75±1.47mg/(kg.min)，差异有统计学意义（P﹤0.01）；两组体重差异仍无统计学意义（P>0.05）；高脂饮食组空腹血糖的水平5.09±0.15mmol/L高于正常饮食组4.85±0.09mmol/L，差异有统计学意义（P﹤0.01）；高脂饮食组胆固醇的水平1.25±0.11mmol/L高于正常饮食组1.07±0.15mmol/L，差异有统计学意义（P﹤0.01）；高脂饮食组甘油三酯的水平0.64±0.05mmol/L高于正常饮食组0.52±0.05mmol/L，差异有统计学意义（P﹤0.01）；高脂饮食组空腹胰岛素的含量27.71±0.93mU/L高于正常饮食组22.87±1.24mU/L，差异有统计学意义（P﹤0.01）。3肝脏HE染色结果显示：4周时正常饮食组中肝细胞形态正常，体积正常；高脂饮食组肝脏细胞部分出现脂肪变性，细胞体积有所增大，胞质中可见部分空泡变性。8周时正常饮食组中肝细胞形态及体积均正常，未见炎性细胞浸润；高脂饮食组肝脏细胞出现弥漫性脂肪变性，以中央静脉区最为明显，细胞体积增大，胞质中可见空泡变性，中央静脉区可见炎性细胞浸润。4肝脏透射电镜结果显示：4周时正常饮食组肝细胞中线粒体内外膜清晰可见，线粒体嵴形态正常，排列规则,胞质中未见脂滴；高脂饮食组肝细胞胞核周围可见散在脂滴，线粒体内外膜清晰可见，线粒体嵴出现部分融合。8周时正常饮食组肝细胞中线粒体形态清晰可见，线粒体内外膜清晰可见，线粒体嵴形态正常；高脂饮食组肝细胞胞核周围可见体积较大的脂滴，线粒体内外膜出现部分或全部融合，线粒体嵴全部消失，呈现空泡化表现。5反映线粒体功能的两个关键酶活性测定结果：4周时高脂饮食组琥珀酸脱氢酶的活性9.203±1.549U/mg.prot，低于正常饮食组琥珀酸脱氢酶的活性11.795±1.829U/mg.prot，差异有统计学意义（P <0.01）；高脂饮食组细胞色素C氧化酶活性1.368±0.170umol/mg.prot与正常饮食组细胞色素C氧化酶活性1.431±0.157umol/mg.prot）相比差异无统计学意义（P>0.05）。8周时高脂饮食组中琥珀酸脱氢酶的活性8.113±0.925U/mg.prot，低于正常饮食组琥珀酸脱氢酶活性10.985±1.044U/mg.prot，差异有统计学意义（P＜0.01）；高脂饮食组细胞色素C氧化酶的活性0.659±0.237umol/mg.prot，低于正常饮食组细胞色素C氧化酶的活性1.364±0.122umol/mg.prot，差异有统计学意义（P＜0.01）。6采用Real-time RT-PCR检测肝脏中Mfn2的mRNA表达情况结果显示：4周时高脂饮食组Mfn2的表达（1.124±0.253）低于正常饮食组（1.784±0.256），差异有统计学意义（P＜0.01）；8周时高脂饮食组Mfn2的表达（0.369±0.129）低于正常饮食组（1.261±0.322）,差异有统计学意义（P＜0.01）。7采用western blot检测肝脏中Mfn2的蛋白表达情况结果显示：4周时高脂饮食组Mfn2的蛋白含量（0.441±0.063）低于正常饮食组（0.577±0.083），差异有统计学意义（P＜0.01）；8周时高脂饮食组Mfn2的蛋白含量（0.334±0.056）低于正常饮食组（0.524±0.060），差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：1随着高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗的加重，肝细胞脂肪变性明显增加，肝细胞线粒体结构受到损害加重。2随着高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗的加重，反映肝细胞线粒体功能的琥珀酸脱氢酶及细胞色素C氧化酶活性逐渐降低。3高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠，肝细胞线粒体融合蛋白2的mRNA表达及蛋白含量减少。