【摘 要】
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目的:研究分析离心力竭运动后和钝挫伤后大鼠骨骼肌自噬相关因子的时相性变化。方法:8周龄雄性SD大鼠42只,分为7组,每组6只:安静对照组(C)、离心力竭运动后即刻组(E0)、离心力竭运动后24小时组(E24)、离心力竭运动后48小时组(E48)、钝挫伤后即刻组(D0)、钝挫伤后24小时组(D24)、钝挫伤后48小时组(D48)。安静对照组在安静状态下,离心力竭运动和钝挫伤分别在即刻、24小时、48
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目的:研究分析离心力竭运动后和钝挫伤后大鼠骨骼肌自噬相关因子的时相性变化。方法:8周龄雄性SD大鼠42只,分为7组,每组6只:安静对照组(C)、离心力竭运动后即刻组(E0)、离心力竭运动后24小时组(E24)、离心力竭运动后48小时组(E48)、钝挫伤后即刻组(D0)、钝挫伤后24小时组(D24)、钝挫伤后48小时组(D48)。安静对照组在安静状态下,离心力竭运动和钝挫伤分别在即刻、24小时、48小时宰杀取血,取右侧腓肠肌,将腓肠肌分为两份保存。用实时荧光定量RT-PCR法检测线粒体自噬因子BNIP3、NIX,自噬体与溶酶体融合因子Lamp-2,自噬适配体因子p62的mRNA表达水平,用Western-Blot法测p62蛋白表达水平。结果:(1)在离心力竭运动组中,与C组相比p62mRNA表达水平在E48组显著上升(P<0.05),E0、E24组无显著差异;与E0组相比,E48组显著增加(P<0.05),E24组无显著性差异。与C组相比,Lamp-2 mRNA水平在E48组显著上升(P<0.05),E0、E24组显著下降(p<0.05);与E0组相比,E48组显著增加(P<0.05),E24组无显著性差异。与C组相比,NIX mRNA表达水平在E48组显著上升(P<0.05),E0组显著下降(P<0.05);与C组相比,BNIP3 mRNA表达水平在E48组无显著差异,E0、E24组显著下降(P<0.05);与E0组相比,E48组显著增加(P<0.05),E24组无显著性差异。另一方面,与C组相比,E0、E24组p62蛋白表达无显著差异,E48组显著上升(P<0.05):与E0组相比,E24组无显著性差异,E48组显著上升(P<0.05)。(2)在钝挫伤组中,与C组相比D0组p62 mRNA水平显著上升(P<0.05),D24组与D48组显著下降(P<0.05);与D0组相比,p62mRNA水平在D48组显著性下降(P<0.01),D24组无显著性差异。与C组相比,D0组Lamp-2 mRNA水平显著上升(P<0.05),D24组与D48组显著下降(P<0.05);与D0组相比D24显著下降(P<0.05)、D48显著下降(P<0.01)。与C组相比,BNIP3 mRNA表达水平在D0组无显著差异,D24组与D48组显著下降(P<0.05);与D0组相比,D24组显著下降(P<0.05),D48组显著下降(P<0.01)。与C组相比NIX mRNA表达水平在D0组无显著差异,D24组与D48组显著下降(P<0.05):与D0组相比,D24组与D48组显著下降(P<0.05)。另外,与C组相比,钝挫伤各组p62蛋白表达无显著差异。与D0组相比,D24组与D48组均无显著性差异。结论:(1)与C组相比,离心力竭运动后E48组p62、Lamp-2、NIX的mRNA显著升高,提示离心力竭运动后48h时自噬上升。(2)与C组相比,p62mRNA水平和Lamp-2 mRNA水平在钝挫伤后即刻显著上升,在钝挫伤后48小时均显著下降,提示自噬在钝挫伤后即刻自噬活性增强,损伤后的48h自噬下降。(3)力竭运动与钝挫伤相比较自噬因子的表达时间上存在差异,基础自噬因子与线粒体自噬因子也不一致。基础自噬因子p62、Lamp-2在离心力竭运动后48小时和钝挫伤后即刻显著上升;线粒体自噬因子BNIP3离心力竭运动和钝挫伤后均未升高,NIX只在离心力竭运动后有升高,其分子机制有待进一步研究。
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