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含叶酸(Folic acid,FA)的口服胰岛素载体能够促进纳米粒子的吸收,提高降血糖效果。含叶酸靶向的纳米粒子是通过小肠上皮细胞的叶酸受体(folate receptor,FR)介导的内吞作用被小肠细胞摄取,这种由受体介导的内吞作用依赖纳米粒子表面FA的密度。本文制备了含FA的纳米级高分子囊泡作为口服胰岛素的载体,探究了不同FA含量的高分子囊泡制剂的降血糖效果。另外,聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)是一种药用辅料,常用作乳化剂、渗透剂、吸收促进剂和P糖蛋白抑制剂等。有研究表明,它能够增强口服胰岛素制剂的降血糖效果。在较佳FA含量的基础上,探究了添加不同TPGS含量的混合高分子囊泡制剂对降血糖效果的影响。以Pluronic(P85)、乙交酯(glycolide,GA)、丙交酯(lactide,LA)和FA等为原料,合成了叶酸摩尔含量为53.41%的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA-P85-PLGA)和不含FA的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(FA-P85-PLGA)。用纳米沉淀法制备得到高分子囊泡,经透射电镜观察到高分子囊泡的形态为球形,为封闭的双层结构。激光散射粒度仪测定得到的高分子囊泡的粒径分布在50-70 nm之间,两种囊泡的ζ电势均为负值。用最高叶酸含量的FA-P85-PLGA培养Caco-2细胞24 h,通过MTT比色实验测定细胞存活率高达96%。调节FA-P85-PLGA和PLGA-P85-PLGA两种聚合物的质量,配置FA含量为10%、20%、40%和50%的高分子囊泡制剂(10%FA-Ps、20%FA-Ps、40%FA-Ps、50%FA-Ps)。对不同FA含量的高分子囊泡对口服降血糖效果的影响进行了体内和体外分析。模拟了不同条件下囊泡的体外释放实验,结果表明囊泡制剂在一定程度上能够保护胰岛素。以FITC-insulin为荧光剂,采用荧光分光光度计检测了Caco-2细胞对不同FA含量的载FITC-insulin高分子囊泡的摄取情况,摄取量为10%FA-Ps>20%FA-Ps>40%FA-Ps>50%FA-Ps>Free insulin。用四氧嘧啶诱导糖尿病大鼠模型,探究了不同FA含量的载胰岛素高分子囊泡的体内降血糖效果,实验表明,随着FA含量的增加,降血糖效果降低,10%FA-Ps具有较好的降血糖效果。在筛选出较佳FA含量的基础上,探究了聚合物与TPGS的质量比分别为5:1、5:3和5:5的混合囊泡制剂(FA-Ps/TPGS5:1、FA-Ps/TPGS5:3、FA-Ps/TPGS5:5)的降血糖效果。随着TPGS含量的增加,胰岛素包埋率增加。体外模拟不同pH值条件下的药物释放实验中,FA-Ps/TPGS5:1、FA-Ps/TPGS5:3和FA-Ps/TPGS5:5的体外累积释放低于47%。与不含TPGS的高分子囊泡制剂组相比,添加TPGS的高分子囊泡制剂,减少了胃肠道中胰岛素的释放量。Caco-2细胞对FITC-insulin摄取结果表明,添加TPGS之后,混合高分子囊泡的摄取量呈现先增加后减少的趋势,FA-Ps/TPGS5:1的摄取量最高。体内降血糖实验中,10%FA-Ps和FA-Ps/TPGS混合囊泡制剂表现出24小时的降血糖活性,血清胰岛素水平都在6h内达到最大值。FA-Ps/TPGS5:1的相对生物利用度(relative bioavailability,BA_R%)分别是10%FA-Ps、FA-Ps/TPGS5:3 FA-Ps/TPGS5:5的2.04、1.40和2.09倍。因此,FA-PS/TPGS5:1较其它组高分子囊泡制剂具有更好的降血糖效果,是一种较好的口服胰岛素的载体。综上所述,FA-PS/TPGS5:1混合囊泡制剂在口服递送胰岛素方面具有一定的应用价值,该载体有望成为其它肽类和蛋白质的载体。