目的:探讨激活TGR5在食管鳞状癌细胞中的作用及其机理。方法:(一)、根据TCGA数据库对食管癌及TGR5进行分析。(二)、激活TGR5在人类食管鳞癌细胞中的作用。1、培养食管鳞癌细胞,提取RNA并使用q-RTPCR技术检测不同食管癌细胞系中TGR5基因的表达量;2、通过MTT实验检测激活TGR5对食管鳞癌细胞增殖的影响;3、使用细胞划痕实验检测激活TGR5对食管鳞癌细胞迁移的影响;4、利用q-RTPCR技术检测TGR5激活后对食管鳞癌细胞增殖及迁移相关基因的影响;5、通过流式细胞仪检测激活TGR5对食管鳞癌细胞凋亡的影响。结果:(一)、根据TCGA数据库对食管癌及TGR5的分析:1、食管癌的分期和患者的生存率有着明显的相关性,患者随分期进展,其生存率显著下降;2、TGR5广泛表达于正常机体的各个组织中,并在食管中有较高表达;3、TGR5在食管正常组织与癌组织中均有表达,但在癌组织中TGR5的表达量普遍低于正常组织。因此TGR5可以作为食管癌治疗中的一个潜在靶点。(二)、激活TGR5在人类食管鳞癌细胞中的作用:1、TGR5在不同食管癌细胞系中的表达量:TGR5在不同食管癌细胞系中均有表达,KYSE150细胞系中的表达量高于EC109细胞系;2、激活TGR5可以抑制食管鳞癌细胞的增殖作用:根据MTT实验结果,不同浓度INT777处理后,食管鳞癌细胞增殖均受到抑制,浓度越高抑制效果越明显;3、激活TGR5可以抑制人类食管癌细胞系的迁移:细胞划痕实验结果显示,与对照组相比,在KYSE150、EC109细胞系中加入INT777激活TGR5后,细胞划痕愈合能力明显减弱;4、TGR5对食管癌细胞基因表达的影响:(1)q-RTPCR结果显示,在100μM的INT777处理后,KYSE150细胞中促炎促癌基因TNF-α、IL-6、IP-10等以及促迁移基因MMP1、MMP12明显受到了抑制,并且差异有统计学意义(P<0.05)。(2)EC109细胞的q-RTPCR结果显示,EC109细胞中促炎促癌基因TNF-α、IP-10明显受到了抑制,并且差异有统计学意义(P<0.05)。但在其他炎症癌症及迁移相关基因中并没有显著性差异。5、流式细胞仪检测TGR5对食管癌细胞凋亡的影响:结果显示经24h与48h INT777处理的食管癌细胞与阴性对照组结果相比,并没有显著性差异。因此,TGR5在24h与48h对食管癌细胞的凋亡并无影响。关于激活TGR5抑制肿瘤增殖和迁移的分子机制我们正在进一步的探索中。结论:1、TGR5广泛表达各个组织,且在食管癌组织中其的表达量普遍低于正常食管组织;2、激活TGR5可以抑制人食管鳞癌细胞KYSE150、EC109及TE-1的增殖;3、激活TGR5可以抑制人食管鳞癌细胞KYSE150、EC109迁移;4、激活TGR5可以抑制食管癌细胞中促炎促癌基因TNF-α、IL-6、IP-10等以及促迁移基因MMP1、MMP12的表达。