论文部分内容阅读
目的:研究灵芝孢子粉在体外对HepG2细胞生长的抑制作用,建立裸鼠移植瘤模型研究灵芝孢子粉在体内对肝肿瘤的抑制作用并初步探讨其作用机制;对灵芝孢子粉的两个有效成分灵芝三萜及灵芝多糖进行含量测定,为进一步开发和应用灵芝孢子粉提供依据。 方法:(1)运用MTT法研究两种灵芝孢子粉在2500μg/ml、1250μg/ml、625μg/ml、312.5μg/ml四个不同浓度下,对HepG2细胞的抑制作用;通过流式细胞术研究两种灵芝孢子粉在3mg/ml、6mg/ml两个不同浓度下对HepG2细胞生长周期的作用。(2)建立裸鼠皮下移植瘤模型,采用随机区组设计法随机分为空白组、阳性组及灵芝孢子粉高、中、低剂量组。空白组腹腔注射生理盐水,阳性组腹腔注射5-氟脲嘧啶,灵芝孢子粉分高、中、低剂量组(分别为2.1g/kg、1.05g/kg、0.5g/kg)灌胃给药,观察裸鼠肿瘤生长情况,给药21天后处死,取瘤组织称重,计算抑瘤率。取高剂量组及空白组做病理观察,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织结构和细胞形态改变。(3)通过免疫组化(SP法)及病理Imagepro Plus5.0彩色图像半定量分析系统检测裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达。(4)以灵芝酸C2为标准品,通过高效液相色谱法