粗壮脉纹孢菌发酵对豆渣营养成分的影响及多糖分离纯化研究

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从江西传统发酵豆渣食品中分离目标菌株,经鉴定其为Neurospora.crassa(实验室已有研究)。本论文旨在通过实验,确定Neurospora.Crassa发酵豆渣后豆渣中营养成分的变化,同时探索低聚糖、多糖的提取工艺,实现对发酵豆渣产物的新利用,为大豆豆渣的综合利用提供理论指导。1.比较了新鲜豆渣和发酵豆渣中的水分、灰分、脂肪、水溶性糖、异黄酮、脂肪酸、类胡萝卜素等营养成分的变化情况。豆渣发酵后,脂肪从8.07%下降到5.76%,可溶性多糖从28.86%升高到62.50%,异黄酮从0.60mg/g增加到0.66mg/g,β-胡萝卜素色素产量达8.06μg/g。2.采用微量凯氏定氮法测定了Neurospora.crassa发酵豆渣前后总蛋白质含量,Neurospora.crassa发酵使新鲜豆渣粗蛋白含量由24.66%升高至32.59%,采用胃蛋白酶-胰蛋白酶复合法测定了Neurospora.crassa发酵豆渣前后蛋白质消化率;经过发酵后豆渣蛋白质消化率由6.86%升高至14.97%。采用WatersAccQ-Tag法测定了Neurospora.crassa发酵豆渣前后氨基酸及游离氨基酸种类和含量,发酵后豆渣氨基酸和游离氨基酸含量均有明显提高,提示发酵豆渣蛋白质营养价值得到提高。3.采用改良的Southgate法测定了豆渣及粗壮脉纹孢菌(Neurospora.Crassa)发酵后豆渣中总膳食纤维的含量,同时分别测定了水溶性非消化性多糖、水不溶性非纤维素多糖、纤维素、木质素的含量,分别为0.2595%、37.1387%、12.8710%、3.2358%和0.1848%、0.5384%、7.7261%、3.1729%。发现粗壮脉纹孢菌主要针对豆渣中水不溶性非纤维素多糖和纤维素有显著分解效果,而对木质素几乎无作用。4.以低聚糖的含量及其得率为指标,考查提取条件对发酵豆渣低聚糖及多糖提取率的影响,确定最佳工艺提取条件,最佳工艺为;15倍量水煮沸提取2次,每次1h。并将AB-8大孔树脂吸附杂质法、有机溶剂萃取法用于发酵豆渣低聚糖的精制工艺,为工业化生产发酵豆渣低聚糖工艺提供了实验基础。5.提取的Neurospora.crassa发酵豆渣多糖经过除蛋白、脱色、透析得到多糖S。采用DEAE Sephadex A-25柱层析对发酵豆渣多糖进行纯化,得到多糖S1、S5。分别经Sephacryl S-200柱层析进一步纯化,得到多糖SM1、SM5、SP5。采用Sephacryl S-300柱层析鉴定纯化后的多糖的纯度。凝胶过滤法测定分子量分别为;137809、105468、95693。IR分析多糖的结构特点,结果表明SM1、SM5、SP5均具有典型的多糖特征吸收峰。GC确定SM1、SM5、SP5的单糖组成,结果表明主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖六种单糖组成。Neurospora.crassa发酵豆渣提高了豆渣蛋白质和氨基酸含量、提高了体外消化率;发酵豆渣粗纤维下降,可溶性多糖和低聚糖增加;发酵豆渣大豆异黄酮含量相对提高,且Neurospora.crassa发酵过程产生大量β-胡萝卜素。这些结果表明,Neurospora.crassa发酵豆渣可大大提高豆渣的营养和功能价值,可以用于豆渣传统食品工业化生产。
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