玉米自交系的抗旱性评价和ZmNAC基因的分子克隆

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玉米是我国三大粮食作物之一,干旱是影响玉米产量的主要因素,选育抗旱性强的玉米品种对玉米适应干旱和稳产具有重大意义。鉴定和评价玉米抗旱性,对生理特性进行了解,可为抗旱育种提供科学依据,同时也可通过分子生物学技术发掘抗旱基因,将其应用到玉米抗旱育种中,提高玉米抗旱能力。NAC转录因子参与了植物的生长代谢过程,还应答干旱等环境胁迫。本研究以80份玉米自交系为材料,通过对玉米叶片失水率和相对含水量的测定及分析,筛选出15份自交系进行脯氨酸含量、丙二醛含量以及超氧化物岐化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性测定。对五项指标的耐旱系数进行分级,综合评价玉米自交系的抗旱性。据此选出四个典型玉米自交系,分别从中克隆得到ZmNAC25基因,并进行序列多态性分析。同时还对另三个ZmNAC基因进行了初步分析,主要研究结果如下:1.干旱胁迫下,大多数自交系表现出相对含水量下降趋势,失水率、脯氨酸含量、丙二醛含量和三个抗氧化酶类活性均表现出升高趋势。筛选出高抗旱自交系4份,抗旱自交系3份,中抗旱自交系2份,敏感自交系3份,高敏自交系3份。2.利用ClustalW软件对不同玉米自交系来源的ZmNAC25基因进行序列比对分析,对推测氨基酸序列进行序列比对,发现大多数碱基突变并未导致氨基酸位点发生改变,且在总共210个氨基酸位点中,抗旱性相近的自交系间存在的氨基酸位点差异仅有2-5个,说明ZmNAC25氨基酸序列的特征与玉米自交系抗旱性之间可能存在相关性。3.构建ZmNAC25基因的植物过表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥,得到转基因植株。
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