【摘 要】
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目的:本实验采用生物信息学分析与体内外实验研究明确β-葡聚糖抗S180腹水瘤的作用,初步探讨其相关机制。方法:1.通过在线数据库对β-葡聚糖作用靶点与腹水瘤靶点进行预测,利用Cytoscape构建成分-靶点相互作用网络图,对药物潜在作用靶点进行蛋白互作与模块聚类分析,选择腹水瘤数据集进行靶点验证,应用分子对接分析药物作用形式;2.体内实验:建立S180腹水瘤模型,对瘤重、抑瘤率、脾脏指数进行比较;
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目的:本实验采用生物信息学分析与体内外实验研究明确β-葡聚糖抗S180腹水瘤的作用,初步探讨其相关机制。方法:1.通过在线数据库对β-葡聚糖作用靶点与腹水瘤靶点进行预测,利用Cytoscape构建成分-靶点相互作用网络图,对药物潜在作用靶点进行蛋白互作与模块聚类分析,选择腹水瘤数据集进行靶点验证,应用分子对接分析药物作用形式;2.体内实验:建立S180腹水瘤模型,对瘤重、抑瘤率、脾脏指数进行比较;IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ、AST、ALT、BUN、UA、CRE血清中细胞因子进行含量检测;HE染色法观察瘤组织与脾脏组织的病理学改变;Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、VEGFA、JAK2与STAT3蛋白表达,对富集得到的通路进行验证,研究β-葡聚糖体内治疗S180腹水瘤的相关机制;3.体外实验:建立S180细胞与T细胞共培养体系,采用CCK-8法与Western blotting法对S180腹水瘤细胞体外抑制活性进行检测。结果:1.对β-葡聚糖与腹水瘤疾病靶点进行交互分析得到药物潜在作用靶点114个,聚类分析发现VEGFA、HIF1A和STAT3等存在较强相互作用,靶点验证发现腹水瘤患者VEGFA明显增加（P＜0.01）,对接分析发现β-葡聚糖与多个靶点结合不稳定。2.体内实验结果显示,β-葡聚糖能够显著抑制S180腹水瘤的生长;降低荷瘤小鼠脾脏指数;升高血清中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ含量及降低IL-6含量;使肝肾损伤相关指标降低,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡,改善免疫环境发挥抑瘤作用相关（P＜0.05,P＜0.01）。3.体外实验结果显示:β-葡聚糖对S180细胞无直接抑制作用,β-葡聚糖可明显抑制S180细胞/T细胞共培养体系（24h）中的S180细胞增殖并促进凋亡过程（下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax与Caspase-3蛋白表达）,差异具有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）。结论:1.β-葡聚糖通过作用于VEGF、JAK、STAT3、Bcl-2调控EGFR通路发挥较好体内抗S180腹水瘤活性。2.β-葡聚糖体外无直接抑制S180腹水瘤作用,系通过调节免疫系统间接抑制腹水瘤的生长。
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