心脑血管疾病是目前导致人们死亡的头号杀手,人们身体中的高胆固醇含量被认为是诱发心脑血管疾病的主要危害因素。所以研究降胆固醇的方法成为近几年的热门。益生乳酸菌来源广泛、食用安全,人们普遍能够接受。人工Mμ转座重组技术是近几年兴起的一种研究细菌功能基因组的新技术。它具有单点随机插入的特点,所以被众多学者所采用。本实验以植物乳杆菌C3005为研究对象,首先对其降胆固醇功能进行研究,结果表明：植物乳杆菌C3005菌体的生长与胆固醇移除率呈正相关性,在4h-12h内由于菌体处于对数期,胆固醇移除速率也随之增大。当培养基中胆固醇添加浓度为30mg/100mL时,菌体的胆固醇移除率最大,为60.3%。实验中休眠菌体和死菌体都能够降低培养基中的胆固醇含量,且不同浓度的菌体对其胆固醇移除率也具有显著影响。在培养基中含有胆盐的情况下,菌体的胆固醇移除率降低。然后,摸索、优化植物乳杆菌C3005电转化条件,使其电转化效率最大。通过细胞的生长时期、生长培养基组分、恢复培养基组分、恢复培养时间、质粒浓度等因素对转化效率的影响进行研究。结果表明,植物乳杆菌C3005在培养至OD600=0.5时制备感受态细胞,恢复培养基中加入终浓度为0.1mol/L蔗糖,恢复培养2.5h等因素条件下,能够获得较高转化率,约为1.19×105cfu/μg质粒DNA。此外还对前处理MRS培养基中加入0.7M NaCl对电转化效率的影响进行研究,得出当质粒浓度为0.5ng/μL时,Lg(转化子数目/μμg质粒DNA)为6.14。优化质粒电转化条件,为转座复合物的高电转化效率打下基础。最后,利用人工Mμμ转座技术构建植物乳杆菌C3005突变子库。通过对转座DNA的扩增、纯化、浓缩使转座DNA的浓度变高以达到实验所需值,然后制备转座复合物并利用上述优化后的电转化条件进行电转化,获得转化子。本实验已获得72株转化子,并从中得到一株降胆固醇能力降低的突变株。