广金钱草中三种黄酮碳苷的制备与含量测定

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广金钱草(Desmodium styracifolium (Osb.) Merr.)的药用名称源于《岭南草药志》,为豆科山蚂蝗属植物广金钱草的干燥地上部分。性微寒,味甘、淡,归膀胱、肝、胆、肾经,具有清热除湿、利尿通淋、排石之功效。主产于广东、广西、福建、湖南等省区,越南、印度、缅甸亦有分布,是两广地区大宗栽培的药材,民间用来治疗肾、肝、胆结石已有百余年历史,为我国常用的传统中药。现代药理研究表明,广金钱草中的黄酮类物质为其药理作用的主要化学成分,该类化合物能显著抑制血小板聚集,明显增加小鼠心肌营养性血流量,增加狗脑血流量及冠脉血流量,显著增强小鼠常压缺氧耐受力,缓解家兔离体血管条痉挛,对大鼠心肌急性缺血也有明显的保护作用。此外,还能预防草酸钙结石形成和复发、具有抗炎和益智等多种作用。而广金钱草中vicenin-1、夏佛塔苷(schaftoside)和vicenin-3这三种黄酮碳苷类成分含量较高,且尚未有同时测定该三种成分含量的文献报道,因此,本研究旨在建立用RP-HPLC同时测定vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3三种有效成分含量的方法,并分析研究其富集部位,为广金钱草药材的质量控制提供新的理论依据。本研究首先采用大孔树脂柱层析、反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、结晶纯化、制备液相等多种分离手段对广金钱草进行分离纯化,从中制备得到三个单体化合物,利用光谱法(1HNMR、13CNMR)和化学方法对其进行了结构鉴定,分别为:vicenin-1(1)、夏佛塔苷(2)、vicenin-3(3)。3个化合物的纯度均达到98%以上,用以作为含量测定的标准品。通过对广金钱草药材提取方法的筛选和色谱条件的优化,建立了用RP-HPLC同时测定vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3三种有效成分含量的方法。茎中三个化合物的含量分别为0.37mg/g、1.17mg/g、0.37mg/g,叶中三个化合物的含量分别为2.96mg/g、9.97mg/g、3.74mg/g,地上部分三个化合物的含量分别为1.25mg/g、4.10mg/g、1.47mg/g。通过比较广金钱草茎、叶和地上部分中vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3的含量,发现广金钱草各部位中三种化合物的含量差异较大,有效成分多富集在叶子中,叶中三种成分的含量均是茎的8.5倍左右。这一结果对广金钱草药材的采摘有一定的指导意义,同时也完善了广金钱草药材的质量控制研究。
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