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目的:HMGA2蛋白是一种结构性转录因子,能够正性、负性调节许多基因的转录。HMGA2并未直接调节转录,而是通过AT-hook与DNA结合,改变DNA的结构,进而调节转录,或者是直接与转录因子结合,改变转录活性。利用小干扰RNA(siRNA)技术在肺腺癌A549细胞中沉默HMGA2,观察沉默该基因对细胞生长、凋亡的影响,并进一步研究其对Notch信号通路分子Notch1表达的影响,探讨HMGA2对Notch信号通路的影响。分析180例肺癌患者的病例特点,探讨肺癌发病情况的变化及免疫组化指标在肺癌临床诊治的作用。方法:化学合成HMGA2的siRNA,应用脂质体2000将siRNA转染进肺腺癌A549细胞。利用实时荧光定量QRT-PCR技术检测转染24小时后细胞内HMGA2基因表达下降的情况及Notch1基因表达变化。应用蛋白质免疫印迹法(westernblot)检测转染48小时后细胞HMGA2蛋白、Notch1蛋白表达的变化。转染48小时后在相差显微镜下观察细胞形态变化。应用流式细胞术检测转染效率及转染后细胞凋亡率的变化。应用CCK8检测转染后细胞增殖率的变化。对我院胸外科2015年1月至2015年6月手术治疗后病理确诊的肺癌患者病历进行回顾性分析,采用SPSS20.0进行统计分析。结果:(1)用带荧光标记的siRNA转染6小时后,应用流式细胞仪检测到的转染率为95%,表明siRNA可成功转染进细胞。(2)将化学合成的siRNA转染入A549细胞48小时后观察细胞形态,细胞回缩,形态不规则,细胞之间空隙增大。(3)QRT-PCR分别检测转染后HMGA2与Notch1的表达,发现转染后siRNA链1的HMGA2的表达下降67%以上,与对照组比较差异有统计学意义。转染组Notch1的表达下降,与对照组比较差异有统计学意义。转染组Notch1的表达与阴性对照组比较下降了约60%,差异有统计学意义。(4)Westernblot检测转染48小时后细胞HMGA2蛋白和Notch1蛋白表达变化,结果示转染siRNA能够成功下调A549细胞中HMGA2的蛋白表达,同时观察到siRNA-HMGA2转染组Notch1蛋白表达水平的下降。(5)应用CCK8方法检测沉默HMGA2对细胞增殖的影响,结果示siRNA沉默HMGA2基因后A549细胞增殖率降低。(6)流式细胞术检测siRNA转染72小时后细胞凋亡率较对照组升高。(7)180例肺癌患者中腺癌所占构成比为66.7%,高于鳞状细胞癌9.4%。在男性患者中腺癌所占比例(51.4%)也大于鳞癌(21.6%)。(8)免疫组化指标P53、EGFR在肺癌患者中阳性率较高,而ALK阳性率较低。其中ALK的表达在女性患者中较高。结论:HMGA2基因表达水平改变能够影响细胞形态、增殖及凋亡,并与Notch1的表达相关。腺癌已成为肺癌最常见的病理类型,检测免疫组化指标能够为个体化诊治提供线索。