研究背景：随着老年人口数量的剧增，心脑血栓性疾病患者数量也随之增多。目前该类疾病已经严重威胁人类的生命健康，成为我国老年人口中最常见的死亡原因之一，其发病率高居各种疾病榜首，且有渐增之势。心脑血栓性疾病的发病基础主要是血栓形成，而血栓形成是一个多步骤、多因素、复杂的病理过程。揭示血栓形成的机制，对于临床诊断及治疗血栓性疾病具有非常重要的指导意义。脑梗死是常见的心脑血栓性疾病之一，具有突发性、致死性等特点，严重影响中老年人的生活质量。近年，随着社会节奏的不断加快及生活压力的加大，脑梗死的发病率呈逐渐上升趋势，所以脑梗死的预防及治疗对于提高中老年人生活质量意义重大。Semaphorin4D（Sema4D）又称CD100，属于脑信号蛋白（Semaphorin）家族。研究表明Sema4D及其受体在单核细胞、B细胞、内皮细胞及血小板等均有表达，并且参与了这些细胞的活化、迁移等过程。而且Sema4D及其受体Plexin-B1、CD72在免疫、神经等系统的生物学过程中发挥重要作用，同时在肿瘤的生长转移过程中也扮演重要角色。近期少量研究证实Sema4D在血小板活化、动脉粥样硬化及血栓形成等血栓病理过程中发挥重要作用，并且小鼠Sema4D基因敲除后，血小板胶原受体信号受损，血小板功能受抑制，从而该小鼠表现出血栓形成障碍和动脉粥样硬化形成减少[1]。因此我们认为Sema4D水平升高是血栓性疾病发生的一个新的高危因素。尽管部分基础实验研究已初步阐明Sema4D在血栓形成中具有重要意义，但目前这些研究仅限于动物模型，究竟Sema4D在人体内血栓形成过程中发挥了怎样的作用？调控机制又有哪些？目前在国内外尚未见有相关临床研究报道。由于Sema4D在血栓方面的作用是近年来才发现的，国外仅限于少数的基础研究，国内在该方面还未见报道，临床研究则长期处于空白。为此，我们首次在临床上分别从基因水平、血浆及血小板表达水平，探讨了Sema4D与脑梗死疾病的相关性，不仅为脑梗死疾病的预防、诊断及治疗提供一定理论支持，同时也为进一步完善补充Sema4D的生物学作用提供临床资料。我们的此次研究在国内外目前尚属首次，我们希望通过我们的研究可以尽早填补国内外在临床研究方面的空白，并对Sema4D在人类生物功能研究方面提供宝贵的临床数据。目的：1.揭示血浆sSema4D水平在脑梗死疾病发生发展中的意义。2.揭示Sema4D基因表达与脑梗死疾病的相关性。3.探讨脑梗死急性期患者血小板表面Sema4D表达的变化及其与血浆sSema4D的联系及机制。4.探讨脑梗死患者治疗后的血浆sSema4D水平及血小板表面Sema4D表达水平的变化，及两者的联系。5.探讨脑梗死患者治疗前后血小板表面Sema4D表达水平的变化。方法：1.测定脑梗死患者血浆sSema4D水平变化完成收集脑梗死患者、健康对照组的血液样品后，用ELISA法检测各组血浆sSema4D水平。实验分3组：脑梗死急性期组、脑梗死治疗后组、正常对照组。严格按照sSema4D ELISA试剂盒说明书完成实验过程。完成统计分析，探讨脑梗死患者急性期及治疗后血浆sSema4D水平变化。2.测定脑梗死患者Sema4D基因水平变化实验分2组：脑梗死急性期组、正常对照组。每个血液样品收集完成后，立即用淋巴细胞分离液提取总RNA，并进行逆转录合成cDNA，再用Real time-PCR仪检测各细胞Sema4D基因mRNA的表达量。最后进行数据统计分析，探讨脑梗死患者急性期Sema4D基因表达量的变化。3.测定脑梗死患者血小板表面Sema4D水平变化实验分3组：脑梗死急性期组、脑梗死治疗后组、正常对照组。每收集完一个血液样本，立刻进行荧光染色，并由专业技术人员进行流式细胞仪上机检测血小板表面Sema4D表达。所有标本检测完成后，进行统计分析，探讨脑梗死患者急性期及治疗后血小板表面Sema4D表达量的变化。结果：1.脑梗死患者血浆sSema4D水平变化1.1脑梗死急性期组血浆sSema4D浓度明显高于对照组（P <0.01）。1.2脑梗死治疗后组血浆sSema4D浓度与正常对照组无明显差异（P>0.05）。1.3脑梗死治疗后组血浆sSema4D浓度明显低于脑梗死急性期组（P <0.01）。2.脑梗死患者Sema4D基因水平变化脑梗死急性期患者Sema4DmRNA表达较正常对照组明显增高（P <0.01）。3.脑梗死患者血小板表面Sema4D水平变化3.1脑梗死急性期组血小板表面Sema4D表达明显下调，与正常对照组比较差异显著（P <0.01）。3.2脑梗死急性期组血小板Sema4D表达与血浆sSema4D水平呈负相关（P=-0.328）。3.3脑梗死治疗后组的血小板Sema4D水平较脑梗死急性期组明显上升（P<0.01），但与正常对照组差异不明显（P>0.05），与治疗后组患者的血浆sSema4D浓度无相关性（P>0.05）。结论：1.脑梗死急性期患者血浆sSema4D水平较正常对照组明显升高，意味着其可能参与了脑梗死发生的过程，并可以提示脑梗死的发生。2.脑梗死急性期患者Sema4D基因水平明显高于正常对照组，提示在脑梗死发生过程中，Sema4D基因调控可能发生变化，也可以作为提示脑梗死的发生一个指标。3.脑梗死急性期组血小板表面Sema4D表达较正常对照组明显下降，与血浆sSema4D水平负相关，可能与脑梗死的发生有关，并且提示血浆sSema4D水平升高可能与血小板表面Sema4D有关。4.脑梗死患者治疗后血浆sSema4D水平及血小板Sema4D表达水平基本恢复至正常水平，提示Sema4D不仅参与了脑梗死的发生，可能在脑梗死病程中也发挥重要作用。5. Sema4D可能是血栓性疾病的一个危险因素，检测Sema4D对脑梗死的临床诊断及治疗具有一定的参考价值。