黑果枸杞花色苷提取与辅色及对APAP诱导小鼠肝损伤保护作用研究

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:Mr_Sunfox
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花色苷是属黄酮类化合物的一类水溶性天然色素。由于花色苷具有鲜艳的颜色以及诸多药理活性,目前花色苷在食品和药品领域作为人工色素的替代品以及保健品被广泛开发。黑果枸杞主要分布在中国青海等地,作为药食同源的功能性食物已有近千年的历史。黑果枸杞中富含花色苷和多酚类物质。本研究从黑果枸杞中花色苷的提取工艺着手,以期改善黑果枸杞花色苷(Lycium ruthenicum Murr.Anthocyanin,LA)的提取工艺,为工业化生产LA提供绿色、科学以及高效的方法。为了改善花色苷的稳定性,本论文拟使用有机酸作为LA的辅色剂,以期通过辅色作用来增强LA的稳定性。本研究进一步研究了 LA对对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其可能机理,为深入研究及开发利用LA提供参考和依据。主要研究内容和结果如下:1.采用响应面法在单因素实验基础上,优化了超声波辅助乙醇提取黑果枸杞中总花色苷以及总多酚的工艺。超声波辅助乙醇提取总花色苷的较佳工艺为:粉碎粒度80目,86%乙醇溶液,提取溶剂倍数30倍,提取温度50 ℃,超声波辅助提取10 min,平均提取得率为475.58 mg/100g。超声波辅助乙醇提取总多酚的较佳工艺为:粉碎粒度80目,85%乙醇溶液,提取溶剂倍数30倍,提取温度68℃,超声波辅助提取10min,平均提取得率为28.89mg/g。2.使用有机酸作为LA的辅色剂并通过吸光度、最大吸收波长、褐变指数、聚合物颜色指数、抗氧化能力、总花色苷的降解、花色苷组分变化以及降解动力学参数综合得出:水杨酸可以作为LA在60 ℃及其以下温度避光保存的辅色剂。水杨酸辅色可以通过减少溶液的自聚合效应以显著地提高溶液的吸光度、花色苷的稳定性、增加溶液的最大吸收波长、减少溶液的褐变指数并且不会明显改变溶液中花色苷的组分。3.通过整体药理实验研究LA对APAP诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)以及谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)的含量、计算小鼠肝脏指数并结合观察小鼠肝组织病理切片。结果表明,LA对APAP诱导小鼠肝脏肿胀具有剂量依赖性地显著缓解作用;LA能够剂量依赖性地显著降低APAP诱导的小鼠血清中ALT和AST活力的升高。4.为了阐明LA对APAP诱导的小鼠急性肝损伤保护作用的机理,本论文考察了 LA对APAP诱导的急性肝损伤小鼠肝组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力和丙二醛(Malondialdehyd,MDA)水平的影响结果表明,LA对APAP诱导小鼠急性肝损伤所引起的肝脏中GSH含量以及SOD活力降低具有剂量依赖性地显著提高作用,LA对APAP诱导小鼠急性肝损伤所引起的肝脏中MDA水平升高具有剂量依赖性地显著下调作用。因此,LA对肝脏保护作用的机理至少部分可用提高肝组织中SOD活力以及GSH含量,降低肝组织中MDA的水平以增强肝脏的抗氧化防御来解释。
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