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目的:研究口服肝宝胶囊对二甲基亚硝胺(DMN)及硫代乙酰胺（TAA）诱导大鼠肝纤维化模型的治疗作用，探讨其作用机理，为临床应用提供依据。 方法:雄性SD大鼠分为溶剂对照鼠和模型鼠。模型鼠给予0.5％DMN腹腔注射（10mg/kg，每周3次，连续4周）制备大鼠肝纤维化模型后，再分为模型对照组和药物组。药物处理动物分为肝宝胶囊2.0g原生药/kg、肝宝胶囊4.0g原生药/kg、肝宝胶囊8.0g原生药/kg、扶正化瘀胶囊3.0g/kg及双环醇0.2g/kg，分别给予相应剂量药物，每天1次，持续4周。末次给药后24h，检测大鼠体重、肝重、肝血流量、肝门静脉压，检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)，总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)以及α-2巨球蛋白(α-2MG)、层黏蛋白(LN)水平;检测肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量;检测肝内IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-6、IFN-γ、IL-18、TNF-α、 TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、MMP2、MMP8、TGFβRⅡ、P-ERK/MAPK1/2、P-Smad2、P-AKT、P-Smad3、Smad4;肝脏HE、Masson染色观察组织形态变化和肝内胶原沉积情况，免疫组化染色检测肝内α-SMA表达。 雄性SD大鼠分为溶剂对照鼠和模型鼠。模型组大鼠自由饮用TAA水溶液（0.03％ TAA饮用9周后改用0.04％TAA饮用14周），造模15周时随机抽取2只动物作病理检查、确定造模成功后继续给予造模药8周。在造模15周时，模型动物分为模型对照组和药物组。药物处理动物分为肝宝胶囊2.0g原生药/kg、肝宝胶囊4.0g原生药/kg、肝宝胶囊8.0g原生药/kg、扶正化瘀胶囊3.0g/kg及双环醇0.2g/kg，分别给予相应剂量药物，每天1次，持续8周。末次给药后24h，检测大鼠体重、肝重、肝血流量、肝门静脉压，检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)，总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(T-BiL)、血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）、Ⅳ型胶原(Col.Ⅳ)以及层黏蛋白(LN)水平;检测肝内羟脯氨酸(Hyp)含量;检测肝内IFN-γ、 TGF-β1、 PDGF-BB、IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-18、MIP-1α、MIP-2、MCP-1、TNF-α、P-CREB、P-JNK、P-NF-kB、P-P38、P-ERK1/2、P-Akt、P-p70S6K、P-STAT3、P-STAT5;肝脏HE、Masson染色观察组织形态变化和肝内胶原沉积情况，免疫组化染色检测肝内α-SMA表达。 结果: 1.肝宝胶囊对DMN诱导大鼠肝纤维化模型的治疗作用 模型对照组大鼠肝脏绝对重量及肝脏系数、血清TP及ALB含量较溶剂对照组有显著下降(p＜0.05);肝内血流量较溶剂对照组有轻度下降;模型对照组大鼠血清ALT、AST、ALP、肝内Hyp、肝门静脉压、肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较溶剂对照组有显著升高(p＜0.05)。 肝宝胶囊2.0g原生药/kg组肝脏绝对重量及肝脏系数、血清TP及ALB含量较模型对照组有一定程度增加;肝内Hyp含量、肝门静脉压、肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);血清ALT、 AST、 ALP含量较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊4.0g原生药/kg组肝脏系数较模型对照组有显著升高(p＜0.05);肝脏绝对重量较模型对照组有一定程度增加;肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);血清AST及ALP含量、肝内Hyp含量、肝门静脉压较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊8.0g原生药/kg组肝脏系数较模型对照组有显著升高(p＜0.05);肝脏绝对重量、血清ALB含量、肝内血流量较模型对照组有一定程度增加;肝内Hyp含量、肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);血清ALT、AST及ALP含量、肝门静脉压较模型对照组有一定程度降低。 2.肝宝胶囊对DMN诱导大鼠肝纤维化模型的治疗机理研究 模型对照组大鼠血清α-2MG、肝内MMP-2、TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、α-SMA阳性表达率较溶剂对照组有显著升高(p＜0.05);血清LN、肝内MMP-2较溶剂对照组有轻度升高;肝内IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、INF-γ、 TNF-α、P-Akt、Smad4较溶剂对照组有显著下降(p＜0.05);肝内IL-18较溶剂对照组有轻度下降。 肝宝胶囊2.0g原生药/kg组肝内IL-4、IL-6、Smad4较模型对照组有一定程度增加;肝内IL-1β、MMP-2、TGFβ-2、α-SMA阳性表达率较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内IL-1α、TGFβ-1、TGFβ-3、TGFβRⅡ、P-ERK/MAPK1/2较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊4.0g原生药/kg组血清α-2MG、LN、IL-4、IL-6、Smad4较模型对照组有一定程度增加;肝内IL-1β、α-SMA阳性表达率较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内IL-1α、TGFβ-1、TGFβ-2、TGFβ-3、TGFβRⅡ、P-ERK/MAPK1/2较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊8.0g原生药/kg组血清α-2MG、LN、IL-4、IL-6、INF-γ、Smad4较模型对照组有一定程度增加;肝内TGFβ-3、α-SMA阳性表达率较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内IL-1α及IL-1β、TGFβ-2较模型对照组有一定程度降低。 3.肝宝胶囊对TAA诱导大鼠肝纤维化模型的治疗作用 模型对照组大鼠肝脏系数、血清ALT、AST、ALP、T-BiL、肝内Hyp、肝门静脉压、肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较溶剂对照组有显著升高(p＜0.05);肝血流量较溶剂对照组有显著降低(p＜0.05);血清TP较溶剂对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊2.0g原生药/kg组大鼠血清TP、肝血流量较模型对照组有显著升高(p＜0.05);大鼠血清ALT、AST、ALP、T-BiL、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内Hyp、肝门脉压、肝纤维化程度较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊4.0g原生药/kg组大鼠血清TP、肝血流量较模型对照组有显著升高(p＜0.05);大鼠血清ALP、T-BiL、肝门脉压、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);血清ALT、肝内Hyp、肝纤维化程度较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊8.0g原生药/kg组大鼠血清TP、ALB、肝血流量较模型对照组有显著升高(p＜0.05);血清ALP、T-BiL、肝内Hyp、肝纤维化程度、肝胶原容积百分比较模型对照组有显著降低(p＜0.05);血清ALT、肝门脉压较模型对照组有一定程度降低。 4.肝宝胶囊对TAA诱导大鼠肝纤维化模型的治疗机理研究 模型对照组大鼠血清ANG-Ⅱ、肝内IL-18、α-SMA阳性表达率较溶剂对照组有显著升高(p＜0.05);血清Col.Ⅳ、肝内TGF-β1、MIP-2较溶剂对照组有一定程度升高;肝内IL-1α、 IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10、IL-12p70、TNF-α、 MCP-1、P-JNK、P-NF-kB、P-Akt、P-CREB、STAT3、STAT5、p70S6K较溶剂对照组有显著下降(p＜0.05)。 肝宝胶囊2.0g原生药/kg组大鼠肝内IL-6、P-JNK、P-NF-kB、P-Akt较模型对照组有显著升高(p＜0.05);肝内IL-1α、 IL-1β、IL-4、IL-10、IL-12p70、P-NF-kB、P-CREB较模型对照组有一定程度升高;肝内IFN-γ、肝α-SMA阳性表达较模型对照组有显著下降(p＜0.05)。 肝宝胶囊4.0g原生药/kg组大鼠肝内IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10、P-NF-kB、P-Akt、P-CREB较模型对照组有显著升高(p＜0.05);肝内IL-1α、IL-12p70、P-JNK较模型对照组有一定程度升高;肝α-SMA阳性表达较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内IFN-γ、 IL-18、MIP-2较模型对照组有一定程度降低。 肝宝胶囊8.0g原生药/kg组大鼠肝内IL-6较模型对照组有显著升高(p＜0.05);肝内IL-1α、IL-4、IL-10、IL-12p70、P-Akt、P-CREB较模型对照组有一定程度升高;肝内IL-18、肝α-SMA阳性表达较模型对照组有显著降低(p＜0.05);肝内IFN-γ、TGF-β1、MIP-1α、MIP-2较模型对照组有一定程度降低。 结论:肝宝胶囊对DMN及TAA诱导的大鼠肝纤维化均有较好的治疗效果。 肝宝胶囊通过以下几个方面治疗肝纤维化:促进肝细胞及巨噬细胞合成和分泌α-2MG，通过α-2MG载体效应减少肝内IL-1及TGF-β水平，减少TGF-βⅡ型受体数量，降低ERK/MAPK、Smad3磷酸化水平，激活JNK、NF-Kb、AKt、CREB信号通路，促进Th2细胞分泌IL-4，促使巨噬细胞从促炎性表型转化为抗炎及修复性表型极化，增加了IL-10、IL-6的分泌，降低MIP-1α、MIP2、IL-18含量，保护肝细胞、减少肝内炎症、促进组织修复。最终抑制HSC活化、增殖，减少α-SMA表达，从而减少ECM形成，达到治疗肝纤维化的作用。