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真菌细胞壁具有特殊的结构,因而是筛选抗真菌剂的理想靶标。本实验室以通过基因敲除法构建的三株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)△ks1、CHT020、CHT003及其野生型WHU2a为模型,通过双层平板滤纸片扩散法从100种中草药75%醇提取物中筛选到了一种特异性抑制△fks1菌株的中草药——云木香根,对WHU2a、△fks1、CHT020、CHT003 的 MIC 分别为 64μg/mL、16μg/mL、64μg/mL和 64 μg/mL。研究发现,云木香根石油醚提取的抗真菌效果最强,且该石油醚提取液在低温(-20 ℃、4 ℃)和高温(60 ℃、80 ℃、100 ℃)下均较稳定,但在115 ℃会丧失部分活性;依次经过酸碱溶液的处理,活性物质没有损失;通过捷克八溶剂法初步分析云木香根中含有两种活性物质,均为非水溶性Ⅰ类抗生素。应用薄层层析法对云木香根石油醚提取的活性成分进行初步分离,其最佳展开剂为石油醚:二氯甲烷:乙酸乙酯:乙酸=30:10:2:1,以此为基础通过硅胶柱层析的方法获得纯度达到98.36%的抗真菌活性物质——去氢木香内酯。对去氢木香内酯的抗真菌机理进行了初步的研究。研究表明,当去氢木香内酯浓度为4096μg/mL,苯胺蓝荧光法测定其对β-1,3-葡聚糖合酶的抑制率达到94.42±6.66%;32 μg/mL(IC20)的去氢木香内酯处理野生型WHU2a后,其β-葡聚糖含量减少了 18.4%,几丁质含量变化甚微;山梨醇能挽救去氢木香内酯对WHU2a的抑制;36 μg/mL(IC50)的去氢木香内酯处理WHU2a,对其细胞壁进行了 CFW和苯胺蓝的染色,也表现出β-葡聚糖含量减少的现象。综上实验结果,去氢木香内酯能够特异性抑制酿酒酵母β-葡聚糖合酶的活性。因此,去氢木香内酯可以作为一种有前景的通过抑制葡聚糖合酶的抗真菌剂。