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目的:通过对大熊猫体表真菌多样性的研究,为研究大熊猫真菌性皮肤病奠定基础,为正确诊断和治疗真菌性皮肤病提供参考。方法:本试验通过采集不同季节(3、6、9和12月)大熊猫被毛,进行真菌分离培养、形态学鉴定,并以真菌ITS序列通用引物ITS1、ITS4对全部分离株进行PCR扩增、序列测定和系统发育分析。利用丹麦Rosco纸片扩散法,用5种抗真菌药(两性霉素B、制霉菌素、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑)对15种酵母菌进行药敏试验。结果:通过分离培养,获得真菌165株,秋季(9月)分离到的菌株数量最多,为50株(19个属中,鉴定出19个种,15株只能鉴定到属水平),占总菌株数量的30.3%;夏季(6月)分离到的菌株数量及种类数最少,为38株(包含8个属,鉴定出8个种,5株只能鉴定到属水平),占总菌株数量的23%。本次试验总菌株中,毛孢子菌属48株,占总菌株数量的29%,为本次试验的优势属。指间毛癣菌(Trichophyton interdigitale)在总菌株中所占的比例为6%;Aspergillus versicolor,Aspergillus versicolor 在总菌株中均占比例为 5%;Lecanicilliumlecanii在总菌株中所占比例为4%,均为优势菌种。药敏试验结果表明:Cryptococcus fraiola,Trichosporonmiddelhovenii 对酮康唑耐药;Candida catenulate,Tichophyton interdigitale对两性霉素 B耐药;Candidacatenulate,Trichosporon jirovecii对伊曲康唑耐药;Trichosporon sp.对氟康唑耐药;Trichosporon cutaeum,Candida catenulate 对制霉菌素耐药。结论:大熊猫被毛可培养真菌种类丰富,具有丰富的微生物多样性。不同季节采集的样品,在相同培养条件下分离到的菌株数量及真菌种类具有差异,且秋季两者数量都最高。分离到的菌株中,毛孢子菌属为优势属。药敏试验结果表明15种酵母菌存在对5种抗真菌药(酮康唑、两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑、制霉菌素)中一种或多种耐药的菌株。