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目的:1.探讨雷公藤甲素(TP)对耐药慢性粒细胞白血病(CML)细胞株(K562/G01)增殖抑制和诱导凋亡的作用。2.探讨TP对K562/G01中Wnt/β-catenin信号通路的调控影响。3.为TP对CML的临床治疗提供理论基础。方法:采用10、20、40、80nmol/L浓度的TP,作用于K562/G01细胞株,在12、24、48 h三个时间点,分别检测以下指标。1.噻唑蓝(MTT法)检测细胞增殖抑制率。2.Annexin V/PI双染色法结合流式仪(FCM)检测细胞凋亡率。3.实时定量的聚合酶链式反应(RT-PCR)检测BCR-ABL、β-catenin及其下游靶基因Lef-1、cyclinD1的mRNA表达情况。结果:1.MTT法检测结果显示,TP对于K562/G01细胞的生长有及其明显的抑制作用,伴随作用时间延长以及药物浓度提高,细胞的生长抑制率逐步升高,呈现时间-剂量依赖性。相同的时间节点,不同浓度的TP组间细胞的增殖抑制率之间,其差异具有统计学意义(p<0.05),其中24小时时间点20 nmol/L、40 nmol/L两个浓度药物对应的增殖抑制率为(22.62±1.33)%、(51.41±1.39)%。2.FCM检测发现,TP作用于K562/G01细胞后,伴随浓度增高,细胞早期、晚期凋亡率均呈上升趋势,且呈现浓度依赖性。药物作用24小时后,对照组、20nmol/L、40nmol/LTP对应的早期凋亡率分别为(2.54±0.50)%、(6.53±0.52)%、(9.54±0.68)%,晚期凋亡率分别(6.67±0.06)%(6.91±0.14)%、(7.64±0.47)%,差异有统计学意义(p<0.05)。3.定量PCR的检测结果提示,随着TP浓度增高,观察组中BCR-ABL mRNA的表达量减少明显;β-catenin及下游靶基因Lef-1、cyclinD1的mRNA同时降低,呈剂量依赖性。结论:1、TP可以明显抑制K562/G01的增殖,该效应呈时间-剂量依赖性;2、TP可以明显促进K562/G01的凋亡,该效应也呈时间-剂量依赖性;3、TP作用于CML后,能够抑制增殖、诱导凋亡,可能是通过减少β-catenin及下游靶基因Lef-1、cyclinD1的mRNA,即通过降低抑制Wnt/β-catenin信号通路来发挥抑制BCR-ABL mRNA。