妥曲珠利触变混悬液在仔猪体内的药动学及靶动物安全性研究

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妥曲珠利作为动物专用的三嗪酮类抗球虫药,具有高效、广谱的特点。口服给药吸收良好,无致畸形、致突变作用,安全性高。妥曲珠利触变混悬液是妥曲珠利的一种新型的成方制剂,临床上拟用于治疗由猪孢子球虫和一些艾美耳球虫引起的仔猪腹泻等肠道疾病。本文对妥曲珠利触变混悬液在仔猪体内的药动学以及在靶动物仔猪的安全性进行研究,获得相关实验数据,以了解妥曲珠利触变混悬液在仔猪体内吸收、代谢规律以及安全剂量范围。该实验不仅为临床合理用药提供依据,也能为研究该药在仔猪体内的消除动态、蓄积特性及残留消除规律提供参考。1.血浆中妥曲珠利含量的HPLC检测方法采用高氯酸提取血浆中的妥曲珠利,以乙腈:磷酸二氢钾缓冲液(52/48,V/V)作为流动相,利用高效液相色谱(HPLC)紫外检测器检测妥曲珠利含量。检测波长为240nm,流速为1.0mL/min。结果表明,妥曲珠利工作液在0.05-50μg/mL范围内呈良好的线性关系(R2≥0.9998)。血浆中妥曲珠利添加浓度为0.1、5、.50μg/mL时,回收率均大于90%;日内和日间变异系数均小于3%。2.妥曲珠利触变混悬液内服给药在猪体内药动学特征本论文对进口5%妥曲珠利混悬液和国产5%妥曲珠利触变混悬液在断奶仔猪体内进行比较药动学研究。选取初始体重约10kg的断奶仔猪16头,采用单剂量平行对照试验设计,将16头健康断奶仔猪随机分为2组,公母各半,每组8只。对照组内服5%妥曲珠利混悬液,试验组内服5%妥曲珠利触变混悬液,给药后按规定时间采血,分离血浆,通过本论文建立的HPLC方法检测药物浓度。实测血药浓度-时间数据采用Winnonlin5.2药动学分析软件计算药代动力学参数。妥曲珠利混悬液对照组单剂量内服后,其平均消除半衰期(T1/2β)约为47.522h,达峰时间(Tmax)和峰值浓度(Cmax)分别为17.50 h和27.565 mg/L,平均药时曲线下面积(AUC)为1573.452μ_g/mL/h,平均滞留时间(MRT)60.226h;妥曲珠利触变混悬液试验组单剂量内服后,其平均消除半衰期(T1/2β)约为46.367 h,达峰时间(Tmax)和峰值浓度(Cmax)分别为31.50 h和22.402mg/L,平均药时曲线下面积(AUC)为2285.443μg/mL/h,平均滞留时间(MRT)78.483 h。与对照组比较,其相对生物利用度F达145.25%。统计学分析结果表明,受试品的消除半衰期(T1/2β)、达峰浓度(Cmax)与对照组相比无显著差异(P>0.05),但平均药时曲线下面积(AUC)、达峰时间(Tmax)、平均滞留时间(MRT)等参数差异显著(P<0.05),受试品达峰时间和平均驻留时间明显延迟。因此妥曲珠利触变混悬液在单剂量内服给药仔猪与妥曲珠利混悬液相比,妥曲珠利触变混悬液吸收更完全,有效血药浓度维持时间更持久。3.妥曲珠利触变混悬液对靶动物猪的安全性试验32只4日龄杜洛克仔猪随机分为4组(每组8只),采用多剂量水平给药进行研究。其中受试药设3个剂量组,每1kg体重分别经口灌服20mg/kg(1倍推荐剂量组)、60mg/kg(3倍推荐剂量组)、100mg/kg(5倍推荐剂量组),连续给药3次,每次间隔2日;另设一空白对照组,每1kg体重经口灌服生理盐水1.0mL,连续给予3次,每次间隔2日。给药前和最后一次给药后24 h分别经猪的前腔静脉采集血液,其中全血作血常规指标检验,血清用作血液生化指标检测。试验结束后,对所有动物进行安乐死,并剖检进行病理学检查。结果表明,实验组中的所有动物在试验期间均未死亡,临床观察表现正常,所有动物的组织器官剖检均未出现异常病理变化。在血液学及生化指标方面,20mg/kg组、60mg/kg组、100mg/kg组与空白对照组相比,各项指标的数值均在正常范围之内,且大部分指标与对照组相比差异均不显著,存在差异的少数参数无剂量相关性。本实验证明了经口灌服100mg/kg(5倍剂量)以内的妥曲珠利触变混悬液对靶动物猪无毒害作用。
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