刺激响应性聚谷氨酸基纳米胶束的合成及控释性能研究

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聚合物胶束特殊的核-壳结构可作为抗肿瘤药物的微存储器,是一种理想的药物释放体系。然而临床试验和总结发现,这种传统的聚合物胶束缺乏对肿瘤细胞的特异性识别和结合功能,对肿瘤部位响应迟钝或无响应,药物无法准确及时到达病灶部位,降低药物疗效。针对上述问题,可以在聚合物胶束的表面或内部引入具有靶向性或敏感性基团,使其到达病灶部位后能快速响应并靶向给药,这种设计理念无疑会使药物的释放达到定位、定时、定量的效果,提高其生物利用率。因此,本文旨在设计并制备具有刺激响应性聚合物纳米胶束用于阿霉素的高效负载和肿瘤细胞内触发释放,并期望在肿瘤的诊断和治疗中得到应用。本文首先合成双亲性的聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-聚乙二醇)-聚(L-谷氨酸-γ-苄酯)聚合物PNN,然后用水合肼将PNN中γ-苄酯基团转化为酰肼基团共价负载阿霉素,其在水中自组装形成一种具有温度和p H双重响应性聚合物纳米胶束PNN-DOX。通过IR、1H-NMR及GPC手段对上述聚合物的结构进行表征,证明该制备方法可行。利用UV、SEM、纳米粒度仪等手段测定PNN-DOX胶束的LCST值约为38℃,其纳米粒子分布均匀呈球形;体外释放结果显示该方法制备的PNN-DOX胶束对介质的温度和p H具有较强的刺激响应性;以3T3细胞和He La细胞为模型,该细胞实验及MTT测试结果显示,PNN聚合物具有良好的生物相容性,其制备的PNN-DOX胶束对He La细胞的生长具有明显的抑制效果。为进一步增强胶束纳米粒子的稳定性,本文成功合成双亲性的聚乙二醇-聚(L-谷氨酸-γ-苄酯)聚合物PLE,以胱胺为交联剂与聚合物中的γ-苄酯基团反应得到一种具有二硫键的交联胶束PLS,同时在HBr/HOAc体系中将PLS中剩余γ-苄酯基团转化成羧酸并静电负载阿霉素,其在水中能自组装形成一种具有p H和还原双重响应的交联胶束PLS-DOX。经上述测试方法表明目标产物已经合成,交联前后聚合物胶束均呈形态规整的球形;与未交联胶束PLE相比,交联胶束PLS具有更强的耐盐性和耐稀释性;在模拟人体还原条件(10 m M GSH)的解交联实验中,该聚合物中的二硫键可以快速响应而断裂,其制备的PLS-DOX胶束在体外药物释放实验中显示出优良的p H和还原双重响应性;细胞实验和MTT测试结果显示,PLS交联胶束安全无毒,其制备的PLS-DOX胶束对肿瘤细胞具有较强的抑制和杀伤作用,本文制备的两种具有刺激响应性的聚合物胶束均有望在肿瘤的诊断和治疗中得到应用。
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